[发明专利]急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法在审
| 申请号： | 201810145365.1 | 申请日： | 2018-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN109010357A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 金胜威;王倩;严松范;卢亚洲 | 申请（专利权）人： | 温州医科大学 |
| 主分类号： | A61K31/739 | 分类号： | A61K31/739;G01N15/14 |
| 代理公司： | 浙江纳祺律师事务所 33257 | 代理人： | 朱德宝 |
| 地址： | 325035 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 急性肺损伤 构建 动物模型 肺组织 鉴别 急性肺损伤模型 应用范围广 中性粒细胞 比例变化 巨噬细胞 炎症细胞 应用流 雾化 吸入 匀浆 肺炎 细胞 成功 | ||
1.急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
步骤a，雾化吸入脂多糖，建立动物模型；
步骤b，取动物模型的肺组织；
步骤c，将肺组织酶解后制成肺组织匀浆，采用流式细胞术肺组织炎症各种细胞进行计数分析。
2.根据权利要求1所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法，其特征在于，所述动物为小鼠。
3.根据权利要求1所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法，其特征在于，步骤a中，脂多糖的雾化浓度为500μg/ml。
4.根据权利要求1所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，步骤b，取动物模型肺组织时，腹主动脉充分放血，心脏充分抽血。
5.根据权利要求1所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，步骤c中，肺组织加入胰酶以及DNA酶，剪碎，消化后加入含有FBS的培养基来终止胰酶的消化；震荡后过滤，然后重悬2次，计数，调至设定浓度；抗体染色，冰上避光孵育；取出后洗涤、离心，弃上清，.重悬后流式细胞仪检测细胞数。
6.根据权利要求5所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，步骤c中，剪碎肺组织成小块，每块体积1-3mm3。
7.根据权利要求5所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，步骤c中，消化15min。
8.根据权利要求5所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，步骤c中震荡后300目滤网过滤。
9.根据权利要求5所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，步骤c中，设定浓度为1.5*106个/ml。
10.根据权利要求5所述的急性肺损伤炎症消退动物模型的构建方法的制备方法，其特征在于，冰上避光孵育30min。
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