[发明专利]用于鉴定辣椒熟性的InDel分子标记及其应用

权利要求书

1.用于鉴定辣椒熟性的InDel分子标记的引物在鉴定辣椒熟性中的应用；

所述InDel分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述引物包括正向引物FFN1-5UF5、反向引物FFN1-e1R1和反向引物FFN1-PA-R，序列分别如SEQ ID NO:1-3所示；

包括以下步骤：

1）提取待测辣椒的基因组DNA；

2）以待测辣椒的基因组DNA为模板，利用SEQ ID NO:1-3所示引物，进行PCR扩增反应；

3）分析PCR扩增产物；

步骤3）采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物：如果扩增结果出现一条为830 bp的特征条带，则判定待测辣椒为早熟材料；如果扩增结果出现一条为380 bp的特征条带，则判定待测辣椒为具有纯合基因型的晚熟材料；如果扩增结果出现830 bp和380 bp两条特征条带，则判定待测辣椒为具有杂合基因型的晚熟材料；

其中，始花节位为1-4节的为早熟辣椒；始花节位大于4节的为晚熟辣椒。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤2）中PCR扩增反应使用的反应体系为：2×Es Taq MasterMix 5 μL，10 μM正向引物FFN1-5UF5和10 μM反向引物FFN1-e1R1各0.08μL，10 μM反向引物FFN1-PA-R 0.4 μL，80-200 ng/μL DNA模板0.6 μL，ddH₂O 3.84 μL。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2）PCR反应程序：95℃预变性2 min；95℃变性30 s，56℃退火30 s，72℃延伸40 s，38个循环；72℃延伸10 min。