[发明专利]一种高含量花青素芥菜品系及其选育方法

权利要求书

1.一种高含量花青素芥菜品系的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)具有一种花青素来源的芥菜品系的选育：

紫色小白菜09N-742作母本，芥菜作父本杂交得到F1代，筛选F1代中表现型为紫色叶片的单株作母本，芥菜为轮回亲本，连续回交后，筛选回交后代中表现型为紫色叶片的单株进行自交，然后利用基因标记一从自交后代中筛选得到纯合体09N-742-B；

紫叶油菜p1029作母本，芥菜作父本杂交得到F1代，筛选F1代中表现型为紫色叶片的单株作母本，芥菜为轮回亲本，连续回交后，筛选回交后代中表现型为紫色叶片的单株进行自交，然后利用基因标记二从自交后代中筛选得到纯合体p1029-B；

紫叶芥菜1280-1作母本，芥菜作父本杂交得到F1代，筛选F1代中表现型为紫色叶片的单株作母本，芥菜为轮回亲本，连续回交后，筛选回交后代中表现型为紫色叶片的单株进行自交，然后利用基因标记三从自交后代中筛选得到纯合体1280-1-B；

2)具有两种花青素来源的芥菜品系的选育：

纯合体09N-742-B与纯合体p1029-B杂交后自交，然后利用基因标记一和基因标记二，在自交后代中共同筛选得到纯合体09N-742-p1029-B；

纯合体p1029-B与纯合体1280-1-B杂交后自交，然后利用基因标记二和基因标记三，在自交后代中共同筛选得到纯合体1280-1-p1029-B；

3)具有三种花青素来源的芥菜品系的选育：纯合体09N-742-p1029-B和纯合体1280-1-p1029-B杂交后自交，然后利用基因标记一、基因标记二和基因标记三，从自交后代中共同筛选得到纯合体09N-742-p1029-1280-1-B；

4)高含量花青素芥菜品系的选育：纯合体09N-742-p1029-1280-1-B自交，得到高含量花青素的芥菜新品系；

所述的基因标记一是紫色小白菜09N-742基因组中调控花青素代谢基因的标记引物BVRCI613和标记引物BVRCI417；所述的基因标记二是紫叶油菜p1029基因组中调控花青素代谢基因的标记引物598-1；所述的基因标记三是紫叶芥菜1280-1基因组中调控花青素代谢基因的标记引物PLC871；

所述的标记引物BVRCI613具有序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；所述的标记引物BVRCI417具有序列表中SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；所述的标记引物598-1具有序列表中SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列；所述的标记引物PLC871具有序列表中SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法，其特征在于，在步骤1)中，所述连续回交的代数为5代。

3.根据权利要求2所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法，其特征在于，在步骤1)中，所述连续回交在花蕾期进行，人工取出紫色叶片单株的雄蕊后进行人工授粉。

4.根据权利要求3所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法，其特征在于，在步骤1)至3)中，所述自交的代数为1代。

5.权利要求1所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法，其特征在于，步骤4)中高含量花青素芥菜品系的鉴定方法包括以下步骤：

a.取待测芥菜植株叶片，提取DNA做实验组；分别取紫色小白菜09N-742植株、紫叶油菜p1029植株和紫叶芥菜1280-1植株的叶片，提取DNA做对照组；

b.待测芥菜植株的DNA依次与标记引物BVRCI613、标记引物BVRCI417、标记引物598-1和标记引物PLC871进行PCR扩增；紫色小白菜09N-742植株的DNA，依次与标记引物BVRCI613和标记引物BVRCI417进行PCR扩增；紫叶油菜p1029植株的DNA，与标记引物598-1进行PCR扩增；紫叶芥菜1280-1植株的DNA，与标记引物PLC871进行PCR扩增；

c.分别对步骤b的PCR扩增产物进行电泳并观察条带，在标记引物BVRCI613的PCR扩增产物电泳结果中，待测芥菜植株的电泳条带与紫色小白菜09N-742植株的条带相同；在标记引物BVRCI417的PCR扩增产物电泳结果中，待测芥菜植株的电泳条带与紫色小白菜09N-742植株的条带相同；在标记引物598-1的PCR扩增产物电泳结果中，待测芥菜植株的电泳条带与紫叶油菜p1029植株的条带相同；在标记引物PLC871的PCR扩增产物电泳结果中，待测芥菜植株的电泳条带与紫叶芥菜1280-1植株的条带相同；

d.同时符合步骤c中全部电泳结果的待测芥菜为所述高含量花青素芥菜品系。