[发明专利]用于读取生物指示器的设备和方法

权利要求书

1.一种检测生物指示器中的生物活性的方法，包括：

(a) 提供已知量的含有固定数量的酶拷贝的孢子；

(b) 提供包含所述酶的底物的液体生长培养基，其中所述底物具有第一发射光谱，并且其中所述底物被配置为由所述酶转化为具有第二发射光谱的底物衍生物；

(c) 将所述孢子暴露于所述液体生长培养基；

(d) 测量所述液体生长培养基的所述第二发射光谱；并且

(e) 检测：

(i) 所述第二发射光谱随时间无变化；或者

(ii) 所述第二发射光谱随时间呈线性增强。

2.根据权利要求1所述的方法，其中检测到所述第二发射光谱呈线性增强，所述方法还包括监测所述第二发射光谱从所述第二发射光谱呈线性增强到所述第二发射光谱呈指数增强的变化。

3. 根据权利要求1所述的方法，其中所述孢子选自：嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)孢子、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)孢子、萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)孢子、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)孢子、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)孢子、产芽胞梭状芽胞杆菌(Clostridium sporogenes)孢子、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)孢子以及它们的组合。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述酶选自：β-D-葡糖苷酶、α-D-葡糖苷酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、丁酸酯酶、辛酸酯酶脂肪酶、肉豆蔻酸脂肪酶、亮氨酸氨肽酶、缬氨酸氨肽酶、胰凝乳蛋白酶、磷酸水解酶、α-D-半乳糖苷酶、β-D-半乳糖苷酶、酪氨酸氨肽酶、苯丙氨酸氨肽酶、β-D-葡糖醛酸糖苷酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶、β-D-纤维二糖苷酶、丙氨酸氨肽酶、脯氨酸氨肽酶、脂肪酸酯酶以及它们的组合。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述液体生长培养基基本上不含指示剂染料。

6.根据权利要求2所述的方法，其中从所述第二发射光谱呈线性增强到所述第二发射光谱呈指数增强的所述变化发生在少于约2小时内。

7.根据权利要求2所述的方法，其中从所述第二发射光谱呈线性增强到所述第二发射光谱呈指数增强的所述变化发在少于约1小时内。

8.根据权利要求2所述的方法，其中从所述第二发射光谱呈线性增强到所述第二发射光谱呈指数增强的所述变化发生在少于约30分钟内。

9. 一种使用生物指示器的方法，其中所述生物指示器包括：

(i) 盛有第一液体的易碎安瓿，所述第一液体包含液体生长培养基和具有第一发射光谱的荧光酶底物，其中所述荧光酶底物被配置为由所述酶转化为具有第二发射光谱的荧光衍生物，以及

(ii) 载体，所述载体负载已知量的含有固定数量的酶拷贝的细菌孢子；

所述方法包括：

(a) 使所述易碎安瓿破裂；

(b) 将所述液体生长培养基暴露于所述细菌孢子以形成第二液体；

(c) 温育所述第二液体；并且

(d) 监测所述第二液体并检测：

(i) 所述第二发射光谱随时间无变化，或者

(ii) 所述第二发射光谱随时间呈线性增强。

10.根据权利要求9所述的方法，其中检测到所述第二发射光谱呈线性增强，所述方法还包括监测所述第二发射光谱从所述第二发射光谱呈线性增强到所述第二发射光谱呈指数增强的变化。