[发明专利]一种子囊霉素的纯化方法在审
申请号: | 201810156457.X | 申请日: | 2018-02-24 |
公开(公告)号: | CN108409751A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 朱进伟;石磊;潘剑;张敏;彭湘屏;高祥;郑玲辉;滕云 | 申请(专利权)人: | 海正药业(杭州)有限公司;浙江海正药业股份有限公司 |
主分类号: | C07D498/18 | 分类号: | C07D498/18 |
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地址: | 311404 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 子囊霉素 种子囊 大孔吸附树脂富集 浓缩 液相色谱仪 产品纯度 干粉溶解 关键杂质 乙腈溶液 制备工艺 高纯度 浓缩液 上样液 洗脱液 有机相 萃取剂 干粉 甲醇 囊霉 萃取 去除 澄清 | ||
1.一种子囊霉素的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
a)利用大孔吸附树脂柱富集子囊霉素上样液,用75%~90%(mL/mL)乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液并浓缩,在浓缩液中加入萃取剂萃取,并浓缩有机相至干粉;
b)将步骤a)所得干粉用配制反相流动相常用的有机溶剂溶解得上柱液,所述干粉与有机溶剂的重量体积比为6~9:100(g/mL),所述有机溶剂优选甲醇或乙腈,更优选乙腈;将所得上柱液利用制备液相色谱柱分离,以50%~60%(mL/mL)乙腈水溶液为流动相,收集目标组分即为子囊霉素。
2.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤a)中的大孔吸附树脂选自聚苯乙烯类树脂,优选H-60、HB60、HP20、HP21、SP850、SP207、XAD-1600N或XAD-4,进一步优选XAD-1600N、HP20或SP850,更优选XAD-1600N。
3.如权利要求1或2所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤a)中的萃取剂选自乙酸丁酯、二氯甲烷、乙酸乙酯、己烷,优选二氯甲烷、乙酸乙酯,更优选乙酸乙酯。
4.如权利要求1-3任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤b)中制备液相色谱柱的制备填料为C8填料,优选大有C8填料、华谱C8填料、Kromasil C8填料,更优选Kromasil C8填料。
5.如权利要求1-4任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤b)中流动相的pH为3~5,优选3.5,流速为50mL/min~70mL/min,优选70mL/min。
6.如权利要求1-5任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述子囊霉素上样液为子囊霉素粗品经乙醇溶解制得。
7.如权利要求1-6任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述大孔吸附树脂的粒径为0.35mm~0.45mm,特征孔径为形状为球形。
8.如权利要求1-7任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述制备液相色谱柱的制备填料粒径为10μm,孔径为
9.如权利要求6-8任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述子囊霉素粗品中子囊霉素色谱纯度≥64.7%,优选64.7%-75.6%。
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