[发明专利]一种饮料中苯脲化合物的测定方法

权利要求书

1.一种饮料中苯脲化合物的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1. 标准溶液的配制

取10 μL、100 μg/mL苯脲标准混合溶液M-532于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，得到浓度为100 μg/L苯脲标准储备液；取10 μL、100 μg/mL苯脲苯脲示踪物标准溶液M-532SS于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，得到浓度为500 μg/L的示踪物储备液，取一定量的苯脲标准储备液和示踪物储备液，用体积比为1：49的乙腈和水稀释，得到苯脲化合物标准曲线浓度：0.5 μg/L、 1 μg/L、2 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L和100 μg/L；各标准曲线溶液中的苯脲示踪物浓度均为20 μg/L；

S2. 在线固相萃取和分离

采用双梯度高效液相色谱仪对样品溶液、样品加标溶液以及苯脲化合物标准曲线溶液进行上机检测，所述样品溶液采用绿茶饮料，样品加标溶液采用加入了一定量浓度苯脲化合物混合标准溶液的绿茶饮料，所述双梯度高效液相色谱仪含双梯度泵、自动进样器、柱温箱、六通阀、SPE柱、分析柱及二极管阵列检测器；其在线固相萃取和分离过程如下：

0-5.8 min, 六通阀在1-2位，富集泵通过自动进样器完成进样、目标化合物在SPE柱上富集，分析泵在平衡分析柱；

5.8-7.8 min，六通阀在6-1位，SPE柱被引入分析流路，目标化合物从SPE柱上洗脱下来并流入分析柱并开始分离；

7.8-20 min, 六通阀在1-2位，SPE柱被引出分析流路并返回至初始状态，分析柱继续分离目标化合物并返回至初始状态；返回至初始状态的SPE柱和分析柱为下一个样品的分析做准备；

S3. 定性和定量分析

1）定性分析：当试样中目标化合物的保留时间和苯脲化合物混合标准溶液的保留时间误差在5%之内且试样中目标化合物的光谱图与标准溶液的光谱图一致时，则判断试样中含有苯脲化合物；

2）定量分析：连续进九次进样浓度为100 µg/L的混合标准溶液，得到目标化合物保留时间和峰面积的相对标准偏差均小于5%；各个目标化合物色谱图的标准曲线具有良好的线性，且方法的回收率在70-130%范围内，则该方法适用于饮料中苯脲化合物的测定；当某一目标化合物在样品中的信噪比≥10，则认为该目标化合物在该样品中有检出。

2.如权利要求1所述的一种饮料中苯脲化合物的测定方法，其特征在于：所述苯脲化合物为赛苯隆、伏草隆、敌草隆、敌稗隆、环草隆A、环草隆B、特丁噻草隆、利谷隆、除草脲中的一种或多种；所述苯脲示踪物为灭草隆和/或咔唑。

3.如权利要求1所述的一种饮料中苯脲化合物的测定方法，其特征在于：所述在线固相萃取和分离条件如下：

（1）固相萃取系统：

SPE柱：SolEx HRP， 12–14 µm， 2.1 × 20 mm

流动相： A： 水， B：甲醇

流动相梯度： 0–4 min， 10–100% B； 13 min， 100% B； 13.1–20 min， 10% B

流速： 1.0 mL/min

进样体积： 2500 µL；

（2）分析系统：

分析柱：C18，3 µm，3 × 150 mm

流动相：A：20 mM甲酸铵溶液，B：乙腈

流动相梯度：0–4 min，35% B；4.1 min，40% B；7.5–15.8 min，60% B；16 min35% B

柱温：25 °C

流速：0.6 mL/min

检测波长：245 nm

阀切换时间：0 min，1_2； 5.8 min，6_1；7.8 min，1_2。