[发明专利]一种测定玉米须中黄酮类成分含量的方法在审
申请号: | 201810164051.6 | 申请日: | 2018-02-27 |
公开(公告)号: | CN108132317A | 公开(公告)日: | 2018-06-08 |
发明(设计)人: | 刘景圣;张浩;赵城彬;张大力;董怡麟;许秀颖;曹勇;吴玉柱;郑明珠;蔡丹;刘回民;李有宝;闵伟红;习士霞;黄洪亮;刘惠麟 | 申请(专利权)人: | 吉林农业大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/54;G01N30/72 |
代理公司: | 沈阳东大知识产权代理有限公司 21109 | 代理人: | 马海芳 |
地址: | 130118 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 玉米须 黄酮类 超高效液相色谱 乙醇水溶液 串联质谱 检测液 混匀 乙醇水溶液浸泡 微孔滤膜过滤 定量测定 取上清液 溶液回流 室温冷却 质谱联用 灵敏度 外标法 色谱 涡旋 振摇 定性 测试 分析 | ||
1.一种测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:玉米须中黄酮类成分提取
(1)将玉米须粉末加入乙醇水溶液浸泡12h以上,振摇,得到混合均匀的溶液;
(2)将混合均匀的溶液回流1~6h后,室温冷却,得到玉米须乙醇水溶液,其质量浓度为0.01~0.03g/ml;
(3)将玉米须乙醇水溶液涡旋混匀,取上清液采用微孔滤膜过滤,得到检测液;
步骤2:测试
取检测液进行超高效液相色谱串联质谱测试,对测试结果进行分析,采用外标法得到玉米须中黄酮类成分含量。
2.如权利要求1所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的步骤2中,所述的超高效液相色谱的测试条件为:
采用Thermo Hypersil GOLD色谱柱,选用流动相进行洗脱;进样量为5~10μL;柱温为25~35℃;
所述的洗脱为等度洗脱或梯度洗脱;
所述的流动相为甲醇-水、甲醇-0.1%甲酸水溶液、甲醇-水-冰醋酸、乙腈-水、乙腈-水-冰醋酸中的一种;
所述的步骤2中,所述的质谱的测试条件为:采用电喷雾离子源,多离子扫描模式下MRM检测方式;毛细管电压为1.0~5.0kV,离子源温度为100~200℃,脱溶剂温度为300~500℃,脱溶剂气流量为600~700L·h-1,锥孔气流量为30~800L·h-1;碰撞气为氩气,压力为2×10-3~4×10-3mbar;准确质量校正采用NaCsI进行校正。
3.如权利要求1所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的步骤1(1)中,所述的振摇为超声振摇,所述的乙醇水溶液中乙醇的质量浓度为40~60wt%。
4.如权利要求2所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的Thermo Hypersil GOLD色谱柱,型号为柱长为100mm,内径为2.1mm的Thermo HypersilGOLD色谱柱,色谱柱中填料粒径为1.9μm。
5.如权利要求2所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的超高效液相色谱,在超高效液相色谱分析时,各峰与相邻峰的分离度均≥1.5,理论板数测得成分峰计算均≤3000。
6.如权利要求2所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的洗脱为梯度洗脱时,梯度洗脱程序:0-6min:50%B-20%B,6-6.01min:20%B-50%B,6.01-8.5min:50%B;流速:0.3mL·min-1。
7.如权利要求2所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的步骤2(1)中,所述的流动相中,A液B液可以互换,混合比例为任意比例。
8.如权利要求2所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的步骤2(1)中,所述的流动相为甲醇-水-冰醋酸。
9.如权利要求2所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的步骤2(2)中,所述的多离子扫描模式为负离子扫描模式。
10.如权利要求1~9中任意一项所述的测定玉米须中黄酮类成分含量的方法,其特征在于,所述的测定玉米须中黄酮类成分含量中,玉米须中黄酮类成分为木犀草苷、槲皮素、木犀草素、异鼠李素和刺芒柄花素。
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