[发明专利]猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒在审
| 申请号： | 201810173141.1 | 申请日： | 2018-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN108384887A | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 孙东波;翟军军;王恩雨;郭东华;原冬伟;孔凡志;徐亚茹 | 申请（专利权）人： | 黑龙江八一农垦大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6848;C12R1/93 |
| 代理公司： | 大庆禹奥专利事务所 23208 | 代理人： | 朱士文;杨晓梅 |
| 地址： | 163000 黑龙江*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 巢式PCR 检测 副流感病毒 试剂盒 引物 基因 检测结果 内套引物 外套引物 灵敏度 种猪 | ||
1.一种猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒，包括10×PCR反应缓冲液，Mg2+，dNTP，引物和Taq酶，其特征在于：所述的引物为：
(1)检测pPIV-5F基因的外套引物：
pPIV-5-oF：TCGCCGATTAGTGGATGTAATATAA(SEQ ID No.1)
pPIV-5-oR：ATATAGGTCAAATCTAATCCCACAATCT(SEQ ID No.2)
(2)检测pPIV-5F基因的内套引物：
pPIV-5-iF：CCC AAG ATG CTA TCA TTG GCT CAA T(SEQ ID No.3)
pPIV-5-iR：CTAATTTTTCAAGCACGGCTAC(SEQ ID No.4)。
2.根据权利要求1所述的猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒的外套PCR反应体系为cDNA模板3μL，2×permix 12.5μL，10pmol/μL的pPIV-5-oF 1μl，10pmol/μL的pPIV-5-oR 1μL，加ddH2O至25μL体系。
3.根据权利要求2所述的猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒的外套PCR反应条件为94℃2min，95℃20s，55℃20s，72℃30s，30个循环，72℃5min。
4.根据权利要求1所述的猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒的内套PCR反应体系为外套PCR扩增产物1μL，2×permix 12.5μL，10pmol/μL的pPIV-5-iF 1μl，10pmol/μL的pPIV-5-iR 1μL，加ddH2O至25μL体系。
5.根据权利要求4所述的猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒的内套PCR反应条件为94℃2min，94℃20s，58℃20s，72℃10s，25个循环，72℃5min。
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