[发明专利]一种微小隐孢子虫荧光LAMP检测方法在审
申请号: | 201810186378.3 | 申请日: | 2018-03-07 |
公开(公告)号: | CN108893526A | 公开(公告)日: | 2018-11-27 |
发明(设计)人: | 赵光辉;宋军科;王莎莎 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844;C12Q1/04;C12R1/90 |
代理公司: | 西安新思维专利商标事务所有限公司 61114 | 代理人: | 韩翎 |
地址: | 712100 陕西省西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微小隐孢子虫 荧光 特异性引物 重复性试验 标准曲线 反应条件 检测应用 临床样品 熔解曲线 设计合成 位点 引物 耗时 灵敏 绘制 筛选 检测 优化 | ||
1.一种微小隐孢子虫荧光LAMP检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)微小隐孢子虫不同基因位点SSU RNA、COWP、actin、HSP70的特异性引物的筛选确定;
(2)设计合成微小隐孢子虫荧光LAMP的引物,并进行反应条件的优化和标准曲线和熔解曲线的绘制;
(3)特异、敏感性和重复性试验以及临床样品的检测应用。
2.根据权利要求1所述的一种微小隐孢子虫荧光LAMP检测方法,其特征在于:所述的上述步骤的具体步骤为:
(1)微小隐孢子虫不同基因位点的特异性引物筛选确定,引物序列见表1;
(2)根据步骤(1)所确定的微小隐孢子虫特异性PCR扩增引物,以及进行扩增产物的电泳检测;
(3)根据步骤(1)和步骤(2)的试验数据,设计合成微小隐孢子虫荧光LAMP的引物,微小隐孢子虫荧光LAMP的引物见表2;
(4)对设计合成的特异性引物进行灵敏度实验;
(5)对设计合成的特异性引物进行特异性实验;
(6)小隐孢子虫荧光LAMP检测方法临床样品检测。
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