[发明专利]一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器在审
| 申请号： | 201810186457.4 | 申请日： | 2018-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN108314740A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 周亚凤;王绪德;申兆兴;刘雪宾 | 申请（专利权）人： | 上海晶诺生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12M3/00;C12M1/22 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 冯振宁 |
| 地址： | 200120 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞培养容器 蛋白 内壁 修饰 包被 细胞培养 培养液 硅烷化处理 蛋白固定 定向固定 多次利用 培养细胞 融合蛋白 可逆性 镍离子 孵育 构建 减小 偶联 制备 保证 分化 | ||
1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为蛋白GMCSF与蛋白IL4的融合蛋白，蛋白GMCSF的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，蛋白IL4的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示。
2. 一种编码权利要求1所述的融合蛋白的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO:5或SEQ ID NO:6所示。
3.一种重组载体，其特征在于，含有权利要求2所述的基因。
4.一种重组菌株，含有权利要求3所述的重组载体。
5.权利要求1所述融合蛋白、权利要求2所述基因、权利要求3所述重组载体或权利要求4所述重组菌株在诱导单核细胞分化为树突状前体细胞中的应用。
6.一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器，其特征在于，所述细胞培养容器的内壁包被有蛋白。
7.根据权利要求6所述的细胞培养容器，其特征在于，所述蛋白为权利要求1所述融合蛋白。
8.权利要求6所述的细胞培养容器的制备方法，其特征在于，当培养容器的内壁为玻璃时，所述制备方法包括如下步骤：
S1. 给蛋白加上His标签；
S2. 对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理；
S3. 对细胞培养容器的内壁进行AB-NTA孵育修饰；
S4. 加入NiCl2溶液使NTA与Ni偶联，完成镍离子包被
S5. 加入含有His标签的蛋白，与包被的镍离子进行亲和，使其固定在细胞培养容器的内壁。
9.权利要求6所述的细胞培养容器在细胞培养中的应用。
10.权利要求7所述细胞培养容器在诱导单核细胞分化为树突状细胞中的应用。
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