[发明专利]一种硅胶色谱填料、制备方法及其应用

说明书

本发明提供一种硅胶色谱填料、制备方法及其应用，该硅胶色谱填料包括硅胶及键合于所述硅胶表面的有机硅烷，所述有机硅烷包括氨丙基硅烷和其它硅烷，其中所述氨丙基硅烷引入具有空间位阻效应的烷基基团。本发明的硅胶色谱填料，通过引入有机‑无机杂化结构及具有空间位阻效应的烷基基团，有效提高了该硅胶色谱填料的稳定性，用于乳糖分离时，可使得乳糖具有极为优异的峰型、较高的柱效以及稳定的峰面积。此外，该硅胶色谱填料的制备方法具有简单、稳定性好、重现性好以及易于规模化生产等优点。

技术领域

本发明涉及高效液相色谱填充材料，具体涉及一种硅胶色谱填料、制备方法及其应用。

背景技术

乳糖(lactose)是一种双糖，由一分子β-D-半乳糖和一分子α-D-葡萄糖在β-1,4-位形成糖苷键相连，分子式为C₁₂H₂₂O₁₁，相对分子质量为342.3。乳糖有两种端基异构体：α-乳糖和β-乳糖，在水溶液中可互相转化。α-乳糖很容易结合一分子结晶水。乳糖作为一种药用辅料，以填充剂或稀释剂的形式广泛应用于片剂、胶囊、颗粒剂和冻干产品中。目前，市场上有方法采用氢型糖柱或钙型糖柱进行乳糖等糖类目标物的分离，虽然氢型糖柱或钙型糖柱稳定性优于氨基色谱柱，但是该类型色谱柱的选择性有限，其对糖类目标物的分离选择性不如氨基色谱柱，因而现行的国家标准，如2015版《中华人民共和国药典》仍然推荐氨基色谱柱测定方法作为标准测定方法。然而在实际检测过程中发现，采用市面上普通氨基键合硅胶色谱填料进行该项目的测定时，经常会遇到以下问题：(1)柱效达不到所规定的16500块/m理论塔板数；(2)蔗糖和乳糖不能达到基线分离；(3)乳糖峰面积的RSD值不能满足2.0％以下，无法对其进行准确定量。

为了解决上述问题，近年来研制出了一些新型的氨基色谱填料。中国专利CN201310090809.3和中国专利CN 200610015584.5分别采用多氨基基团硅烷化试剂、酰胺基硅烷化试剂和硅胶反应制备了新型氨基键合硅胶色谱填料。这些新型氨基色谱填料可通过次级胺和酰胺等基团的“静电屏蔽”作用减弱硅胶表面残余硅羟基与乳糖目标物之间的相互作用，并增强填料在高比例水相流动相中的稳定性。但是，这类具有“静电屏蔽”作用的新型氨基色谱填料也存在一定的缺点，主要表现在分离乳糖过程中柱效低、峰面积的重复性不够理想、并且对乳糖色谱峰的基线噪音大，从而影响对乳糖定量的准确性。

综上所述，亟需研制一种新的硅胶色谱填料，以解决现有技术中乳糖分离和含量测定存在的诸多问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于乳糖分离与含量测定的硅胶色谱填料及其制备方法，采用该硅胶色谱填料能够解决传统氨基色谱柱对乳糖进行含量测定时存在的柱效低、峰面积不稳定及基线噪音大等问题，具有良好的重现性和稳定性。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种硅胶色谱填料，包括：硅胶及键合于所述硅胶表面的有机硅烷，所述有机硅烷包括氨丙基硅烷和其它硅烷，其中：

所述氨丙基硅烷的化学结构通式为：

其中，R¹为C_2～4的烷基，R²为C_2～4的烷基或C_1～2的烷氧基，X¹为反应活性基团，优选为氯、甲氧基或乙氧基。

根据本发明的一个实施方式，所述其它硅烷的化学结构通式为：

其中，R³、R⁴选自C_1～4的烷基，X²为反应活性基团，优选为氯、甲氧基或乙氧基；n为2～8的整数。