[发明专利]餐饮中金黄色葡萄球菌的快速检测方法有效

专利信息
申请号: 201810193307.6 申请日: 2018-03-09
公开(公告)号: CN108410945A 公开(公告)日: 2018-08-17
发明(设计)人: 董菁;吴静;刘存军;胡孔兴;刘丽;张敏敏;杨浩毅 申请(专利权)人: 芜湖市食品药品检验中心(市药品不良反应监测中心)
主分类号: C12Q1/14 分类号: C12Q1/14;C12R1/445
代理公司: 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 代理人: 任晨晨
地址: 241007 安徽省芜湖*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 金黄色葡萄球菌 菌落 溶血 选择性平板 快速检测 厌氧培养 增菌 餐饮 形貌 兼性厌氧菌 氯化钠肉汤 微生物分析 血浆凝固酶 代谢产物 划线接种 鉴定试验 菌落接种 生化鉴定 培养物 血平板 检测 称取 减小 均质 需氧 观察
【权利要求书】:

1.餐饮中金黄色葡萄球菌的快速检测方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

1)增菌:称取待测样品至氯化钠肉汤中,均质后,厌氧培养;

2)分离:将增菌后的培养物,划线接种到金黄色葡萄球菌选择性平板上,厌氧培养;

3)初步鉴定:根据形貌初步确定金黄色葡萄球菌菌落;

4)确证鉴定:挑取金黄色葡萄球菌选择性平板上至少5个可疑菌落接种到血平板上,培养,观察是否溶血,选取溶血的菌落利用VITEK 2COMPACT全自动微生物分析系统进行生化鉴定;得到结果。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)中所述厌氧培养具体为:36±1℃厌氧培养18h-24h。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述均质为8000r/min-10000r/min均质1-2min。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述金黄色葡萄球菌选择性平板制备方法为:

取Baird-Parker培养基于蒸馏水中加热煮沸至完全溶解,高压灭菌后,加入亚碲酸钾卵黄增菌液,再加入冻干兔血浆,混匀后倾注平板备用。

5.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述金黄色葡萄球菌选择性平板制备方法具体为:

称取6.3g Baird-Parker培养基于95mL蒸馏水中加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15min后,再加入5mL亚碲酸钾卵黄增菌液,冷却至50±1℃后加入0.5mL冻干兔血浆,混匀后立即倾注平板备用。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述厌氧培养是指:36±1℃厌氧培养24h-48h。

7.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,步骤3)初步鉴定方法为:

金黄色葡萄球菌在金黄色葡萄球菌选择性平板上呈圆形,表面光滑、凸起,菌落直径为2-3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色的边缘,周围绕以不透明圈,其外有一清晰透明带。

8.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,步骤4)中所述培养是指于36±1℃培养18h-24h。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)中可疑菌落不足5个全都挑选。

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