[发明专利]餐饮中金黄色葡萄球菌的快速检测方法有效
申请号: | 201810193307.6 | 申请日: | 2018-03-09 |
公开(公告)号: | CN108410945A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 董菁;吴静;刘存军;胡孔兴;刘丽;张敏敏;杨浩毅 | 申请(专利权)人: | 芜湖市食品药品检验中心(市药品不良反应监测中心) |
主分类号: | C12Q1/14 | 分类号: | C12Q1/14;C12R1/445 |
代理公司: | 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 | 代理人: | 任晨晨 |
地址: | 241007 安徽省芜湖*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金黄色葡萄球菌 菌落 溶血 选择性平板 快速检测 厌氧培养 增菌 餐饮 形貌 兼性厌氧菌 氯化钠肉汤 微生物分析 血浆凝固酶 代谢产物 划线接种 鉴定试验 菌落接种 生化鉴定 培养物 血平板 检测 称取 减小 均质 需氧 观察 | ||
1.餐饮中金黄色葡萄球菌的快速检测方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
1)增菌:称取待测样品至氯化钠肉汤中,均质后,厌氧培养;
2)分离:将增菌后的培养物,划线接种到金黄色葡萄球菌选择性平板上,厌氧培养;
3)初步鉴定:根据形貌初步确定金黄色葡萄球菌菌落;
4)确证鉴定:挑取金黄色葡萄球菌选择性平板上至少5个可疑菌落接种到血平板上,培养,观察是否溶血,选取溶血的菌落利用VITEK 2COMPACT全自动微生物分析系统进行生化鉴定;得到结果。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)中所述厌氧培养具体为:36±1℃厌氧培养18h-24h。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述均质为8000r/min-10000r/min均质1-2min。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述金黄色葡萄球菌选择性平板制备方法为:
取Baird-Parker培养基于蒸馏水中加热煮沸至完全溶解,高压灭菌后,加入亚碲酸钾卵黄增菌液,再加入冻干兔血浆,混匀后倾注平板备用。
5.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述金黄色葡萄球菌选择性平板制备方法具体为:
称取6.3g Baird-Parker培养基于95mL蒸馏水中加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15min后,再加入5mL亚碲酸钾卵黄增菌液,冷却至50±1℃后加入0.5mL冻干兔血浆,混匀后立即倾注平板备用。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述厌氧培养是指:36±1℃厌氧培养24h-48h。
7.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,步骤3)初步鉴定方法为:
金黄色葡萄球菌在金黄色葡萄球菌选择性平板上呈圆形,表面光滑、凸起,菌落直径为2-3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色的边缘,周围绕以不透明圈,其外有一清晰透明带。
8.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,步骤4)中所述培养是指于36±1℃培养18h-24h。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)中可疑菌落不足5个全都挑选。
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