[发明专利]蛋白质和糖蛋白的酶解方法有效
申请号: | 201810193453.9 | 申请日: | 2018-03-09 |
公开(公告)号: | CN108410932B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 张怀远;丁玮云;欧凌 | 申请(专利权)人: | 张怀远 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100086 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 糖蛋白 方法 | ||
1.蛋白质或糖蛋白的酶解方法,包括:将反应混合液作为酶解体系滴加到384孔质谱靶板上,放在25-39℃的普通空气环境下孵育5-10分钟,得到含有干燥酶解混合物的靶点;
所述反应混合液包括待酶解物质和蛋白酶;
所述待酶解物质为蛋白质或糖蛋白;
所述反应混合液还含有NH4HCO3;
所述反应混合液中NH4HCO3的浓度为1-5mM;
所述反应混合液中所述待酶解物质与所述蛋白酶的质量比为1:(0.3-3);
所述反应混合液的体积为0.1-10µL。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法还包括:在所述孵育结束后向反应结束后的酶解混合物中加水。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述反应混合液中所述待酶解物质与所述蛋白酶的质量比为1:(0.5-2);
和/或,所述孵育的温度为30-37℃。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述反应混合液中所述待酶解物质与所述蛋白酶的质量比为1:1;
和/或,所述孵育的温度为35℃。
5.根据权利要求1-4任一所述的方法,其特征在于:所述反应混合液的体积大于等于1µL。
6.根据权利要求1-4任一所述的方法,其特征在于:所述蛋白质为BSA、Albumin、Hemoglobin、HSA;所述糖蛋白为Fetuin或HRP。
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