[发明专利]一种植物倍性分析试剂盒

权利要求书

1.一种植物倍性分析试剂盒，其特征在于：包括提取液、染色液、漂洗液，所述的提取液包括提取液A、提取液B和萃取液C，提取液A包括Mgcl2、Nacl、TritonX-100、EDTA、Tris、MOPS、PVP，提取液B为β-巯基乙醇，萃取液C为色谱纯的异丙醇；所述染色液包括RNase A、PI；所述漂洗液为色谱纯的75%乙醇。

2.根据权利要求1所述的植物倍性分析试剂盒，其特征在于，所述的提取液A中还包括NaOH,浓度为1g/L。

3.根据权利要求1所述的植物倍性分析试剂盒，其特征在于：还包括尼龙网、培养皿、离心管、组织剪。

4.根据权利要求3所述的植物倍性分析试剂盒，其特征在于，所述的尼龙网孔径为300或400目。

5.权利要求1-4任一项所述的植物倍性分析试剂盒的使用方法，其特征在于，按照以下步骤进行：

（1）提取液A中加入蛋白酶K，添加浓度为20mg/ml，再与提取液B按照9:1混合，放于4℃预冷备用，现用现配；

（2）称取植物幼叶样本1g，蒸馏水将叶片表面洗净后滤纸吸干，放入4℃预冷的培养皿中，加入2ml步骤（1）中预冷的混合提取液，用组织剪将样本快速剪碎，放到摇床上，冰浴下裂解20min；

（3）用尼龙网过滤，滤液置于1.5ml离心管中，4℃温度下12000 rpm离心10min；

（4）取离心后上清，加入2倍体积的萃取液C，充分混匀后，-20℃静置25min，12000rpm离心10min，小心去除上清，保留管底白色沉淀；

（5）加入漂洗液洗涤沉淀，加入时将沉淀轻轻吹起， 12000rpm离心10min后去除漂洗液，重复洗涤2次；

（6）将洗涤后的沉淀在无菌无DNase环境下干燥15min；

（7）每管加入1ml染色液，避光孵育15min；

（8）上流式细胞仪进行倍性检测。

6.如权利要求5所述的植物倍性分析试剂盒的使用方法，其特征在于，所述步骤（2）剪碎样本的整个过程样本均需泡在提取液中，便于游离细胞核。