[发明专利]可注射型同种异体脂肪脱细胞基质微粒的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种可注射型同种异体脂肪脱细胞基质微粒的制备方法及应用，由吸脂手术得到的脂肪组织，经过机械乳糜化处理、离心去油、后续温和的脱细胞工序，离心进一步脱脂所得；其中，脂肪组织来源于传统肥胖病人吸脂手术废弃的人源性的脂肪颗粒，本发明采用了物理破碎脂肪细胞和脱脂方法以及应用温和脱细胞的技术，操作简便，对脂肪的基质结构和成分破坏小，所获得的材料更接近人体天然脂肪组织微环境，保留了组织的三维结构和活性成分，可用27g的小针头进行注射，注射后更利于受区组织细胞的增殖和分化，从而促进组织的修复与再生，起到长久的填充和年轻化效果。本发明的产品适用于面部年轻化和软组织缺损的修复。

技术领域

本发明涉及医学整形美容材料领域，具体涉及一种可注射型同种异体脂肪脱细胞基质微粒的制备方法及应用。

背景技术

随着社会发展，人们生活水平的提高及近年来微整形的普及，注射填充材料的应用在国际上和国内需求大增。目前常用的注射填充材料是玻尿酸，它优点明显，但也存在着降解吸收问题，而且不能刺激组织再生，所以也不能从基本上解决年轻化问题。

非手术或微创伤治疗是整形美容的发展方向之一，填充治疗常是面部细小皱纹或容量缺失处理的首选方法，全身软组织的填充都可以应用。安全、高效、微创、经济常被作为材料选择的客观标准。目前，市面上已有多种填充材料应用到整形领域，其中，人工合成材料如羟基磷灰石钙、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯酰胺水凝胶、聚乳酸等，虽然具有物理力学、可塑性和长效保持等优点，但由于存在生物相容性及安全性等方面的问题严重制约其发展。生物材料如胶原、透明质酸等目前临床应用较多，当前市场上可注射型胶原蛋白主要分为动物来源的胶原蛋白（来源于牛或者猪）、人胶原蛋白，牛胶原蛋白和猪胶原蛋白由于来源异种，有潜在的超敏反应，注射前须行过敏试验，并且其降解吸收较快，需短时间内补充注射以维持疗效。而人胶原蛋白则具有更佳的生物相容性，且无需皮试，但它同样存在保持时间短的问题，另外，人胶原蛋白还存在着原材料来源困难的问题，费用高。相比之下，透明质酸是一种由葡萄糖醛酸和氨基葡萄糖组成的二糖单体聚合形成的酸性粘多糖，多存在于动物的皮肤和结缔组织内，是构成细胞外基质的必须物质。由于所有生物体内的HA分子结构相同，没有物种及组织的差异，没有免疫原性，因此用于临床注射时，无需做皮试。鉴于其出色的生物相容性和填充效果正逐步取代胶原蛋白，成为当前主流的皮肤填充材料。然而，透明质酸仍是维持时间比较短，因此需要周期性注射，价格昂贵，受众面小。

脱细胞基质是通过各种物理化学方法去除组织中具有免疫原性的细胞成分，尽量其保留基质成分的一种生物材料。脱细胞基质具有天然的生物学结构，含有各类蛋白如胶原蛋白，纤连蛋白，弹性蛋白和蛋白聚糖可以为细胞提供良好的微环境，可以调节细胞行为，促进细胞增殖和分化潜能，因此可诱导注射部位的组织再生，起到长久的填充效果。脱细胞基质在皮肤再生修复、神经修复、防粘连莫、组织填充等方面已经有上市的应用产品。

而相比其他组织，脂肪是人体含量最多的组织类型，而脂肪来源基质成分能够更好诱导脂肪细胞分化，诱导脂肪组织再生。目前尚无采用异体脱细胞脂肪为原料制备可注射充填材料的产品面世。

中国专利CN201610967425.9公开了可注射的脱细胞脂肪基质微粒及其在植入剂中的应用，该方法采用动物组织中的胶原蛋白纤维来制备可注射的脱细胞脂肪基质微粒，存在着引起人体的免疫反应和动物源性病原体传播的顾虑。并且，以异丙醇等各种有机溶剂来进行脱脂，不但耗时长，而且会引起后续有机溶剂残留，影响基质材料的生物安全性和生物活性。此外，该专利制备微粒的方法是动物来源的大块脂肪组织切成薄片经脱细胞后进行低温研磨从而制得可注射微粒，过程复杂，较大的组织块或组织片增加了化学试剂脱细胞的作用时间以及作用浓度，增加试剂残留的风险。试剂残留对细胞有毒性作用，这种脱脂的方法可破坏细胞基质的天然化学结构和成分，材料的生物活性下降，进一步影响了支架材料诱导的组织再生，从而限制其注射填充效果。

发明内容