[发明专利]一种检测人乳头瘤病毒的核酸组合及其应用和试剂盒有效
申请号: | 201810204144.7 | 申请日: | 2018-03-12 |
公开(公告)号: | CN108179226B | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 王河清;张琳;李秀林;张蓉;严浩荣;涂小宝;徐加发;刘中华;王国强 | 申请(专利权)人: | 江苏硕世生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 史晶晶 |
地址: | 225300 江苏省泰州市开发区寺巷富野*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 乳头 病毒 核酸 组合 及其 应用 试剂盒 | ||
1.一种检测人乳头瘤病毒的核酸组合,其特征在于,其包括:SEQ ID NO.1-6所示的引物和SEQ ID NO.7-9所示的探针;
所述核酸组合还包括:
(1)SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.24所示的引物以及SEQ ID NO.34所示的探针;
(2)SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.26所示的引物以及SEQ ID NO.35所示的探针;
(3)SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.25所示的引物以及SEQ ID NO.34所示的探针;
(4)SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.26所示的引物以及SEQ ID NO.35所示的探针;
(5)SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.26所示的引物以及SEQ ID NO.35所示的探针;
(6)SEQ ID NO.14和SEQ ID NO.27所示的引物以及SEQ ID NO.36所示的探针;
(7)SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.28所示的引物以及SEQ ID NO.36所示的探针;
(8)SEQ ID NO.16和SEQ ID NO.30所示的引物以及SEQ ID NO.36所示的探针;
(9)SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.29所示的引物以及SEQ ID NO.36所示的探针;
(10)SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.30所示的引物以及SEQ ID NO.36所示的探针;
(11)SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.33所示的引物以及SEQ ID NO.37所示的探针;
(12)SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.32所示的引物以及SEQ ID NO.37所示的探针;
(13)SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.31所示的引物以及SEQ ID NO.37所示的探针;
(14)SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.33所示的引物以及SEQ ID NO.37所示的探针;
(15)SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.33所示的引物以及SEQ ID NO.37所示的探针。
2.权利要求1所述的核酸组合在制备检测人乳头瘤病毒的试剂盒中的应用。
3.一种检测人乳头瘤病毒的试剂盒,其特征在于,其包括:权利要求1所述的核酸组合。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括以下成分中的一种或多种:
PCR反应液、酶混合液、HPV反应液和阳性对照;
所述HPV反应液中含有所述核酸组合。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR反应液含有以下:去RNA酶水、PCR缓冲液、Mg2+以及dNTPs。
6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述酶混合液含有:Taq酶和UDG酶。
7.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述核酸组合中的探针的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团;
所述荧光报告基团选自FAM、VIC、ROX、Cy3或Cy5荧光报告基团,荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1和Tamra中的任意一种或几种;
SEQ ID NO.7所示的探针的荧光报告基团与SEQ ID NO.8以及SEQ ID NO.34-37所示的探针的荧光报告基团均不同,SEQ ID NO.8所示的探针的荧光报告基团与SEQ ID NO.34-37所示的探针的荧光报告基团不同。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,SEQ ID NO.7所示的探针的荧光报告基团为FAM,SEQ ID NO.8所示的探针的荧光报告基团为VIC,SEQ ID NO.34-37所示的探针的荧光报告基团为ROX。
9.根据权利要求4-8任一项所述的试剂盒,其特征在于,在所述HPV反应液中,所述核酸组合的各引物浓度为0.1~0.5μmol/L,各探针浓度为0.05~0.3μmol/L。
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