[发明专利]一种磷光量子点生物共轭体的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)通过巯基丙酸将油溶性的ZnSe:Mn核转换成水溶性的磷光量子点，加入Zn/MPA和硫脲，搅拌加热回流，离心提纯，真空干燥得到水溶性的ZnSe:Mn/nZnS核壳式磷光量子点；所述n为1-3；

(2)通过偶联剂将所述水溶性的ZnSe:Mn/nZnS核壳式磷光量子点与微囊藻毒素抗体共轭连接，离心纯化得到磷光量子点-抗微囊藻毒素生物共轭体。

2.根据权利要求1所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述油溶性的ZnSe:Mn核的合成方法包括：在Zn和Mn前驱体溶液中加入油酸、十八烯搅拌10-20min，再加入NaHSe搅拌10-20min，反应1.5-3h后，离心分离提纯得到油溶性的ZnSe:Mn核。

3.根据权利要求2所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述Zn前驱体溶液的制备方法包括：将乙酸锌和油胺加入到甲苯中，然后加热，直至醋酸锌完全溶解得到到透明的溶液；以及

所述Mn前驱体溶液的制备方法包括：将醋酸锰和油胺加入到甲苯中，然后加热，直至醋酸锰完全溶解得到透明的溶液。

4.根据权利要求3所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：当制备Zn的前驱体时Zn的加入量为1mmol时，Mn的加入量为0.02-0.1mmol。

5.根据权利要求2所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述油溶性的ZnSe:Mn核中Zn与Se的加入量的摩尔比1-5。

6.根据权利要求1所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述微囊藻毒素抗体的加入量从0.0005-0.002mg时，所述步骤(1)中水溶性的ZnSe:Mn/nZnS核壳式磷光量子点的加入量为0.75mg-6mg。

7.根据权利要求1所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中所述偶联剂选自1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐、羟基琥珀酰亚胺。

8.根据权利要求3所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述的水溶性的ZnSe:Mn/nZnS核壳式磷光量子点中包覆不同层的ZnS壳中，加入的乙酸锌与巯基丙酸与硫脲的摩尔比1:(10-20):1。

9.根据权利要求1所述的磷光量子点生物共轭体的制备方法，其特征在于：所述水溶性的ZnSe:Mn/nZnS核壳式磷光量子点与微囊藻毒素抗体共轭连接的方法包括：将水溶性的ZnSe:Mn/nZnS核壳式磷光量子点溶解在PBS中，再加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐在室温下搅拌5-10min，静置15-20min,充分激活量子点的羧基基团；接着加入羟基琥珀酰亚胺并在室温下搅拌10-20min，最后加入微囊藻毒素抗体，恒温搅拌孵化1-2.5h后加入巯基丙酸终止反应。

10.如权利要求1-9任一项所述制备方法制得的磷光量子点生物共轭体的应用，其特征在于：所述磷光量子点生物共轭体用于检测微囊藻毒素。