[发明专利]一种杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法在审
| 申请号： | 201810210721.3 | 申请日： | 2018-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN108220379A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 赵辉;廖少金;尹顺义;伍活镰;蒋东阳;任政华 | 申请（专利权）人： | 广州齐志生物工程设备有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/08 | 分类号： | C12P21/08;C12M3/00 |
| 代理公司： | 广州胜沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人： | 张帅 |
| 地址： | 510530 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杂交瘤细胞 生产单克隆抗体 放大 细胞 自动化 培养杂交瘤细胞 生物反应器 自动化细胞 二级放大 连续培养 活性高 通气 蛋白 | ||
1.一种杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：将杂交瘤细胞至于生物反应器中连续二级放大自动化培养，包括对杂交瘤细胞进行一级细胞培养和二级细胞放大培养。一级细胞培养生物反应器参数设定为：温度35-37℃，转速20-40rpm，溶氧量30-50％，pH值6.0-7.2，空气、氧气、二氧化碳流量为0.2-0.4L/min、0.4-0.6L/min、0.2-0.4L/min。二级细胞放大培养参数为：温度35-37℃，转速40-60rpm，溶氧量50-60％，pH值6.0-7.2，空气、氧气、二氧化碳流量分别为0.3-0.4L/min,0.4-0.6L/min,2-4L/min。
2.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：初级生物反应器体积7L.杂交瘤细胞密度为1.2×106cells/ml的细胞悬液，200ml,培养基为600ML。经
定时的流加培养基，最终体积至4L培养基，细胞总数2～3×106cells/ml。
3.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：二级生物反应器体积100L,杂交瘤细胞密度为2-3×106cells/ml的细胞悬液4L，培养基18L,经定时流加培养基，总体积至80L,细胞总数8.0X109-3.2X1010cells/ml。
4.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：采用的生物反应器为搅拌通气式生物反应器，体积7L,100L。
5.根据权利要求1所述的交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：所述杂交瘤细胞包括哺乳类动物悬浮细胞、BHK悬浮细胞。
6.根据权利要求1述的杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：所述杂交瘤培养的培养基为SFM培养。
7.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法，其特征在于：所述二级生物反应器杂交瘤培养的培养基和添加剂为SFM培养转铁蛋白、胰岛素，蛋白水解物。
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