[发明专利]一种包含负载新抗原的B细胞疫苗的免疫细胞药物

权利要求书

1.一种免疫细胞制备方法，制备“负载新抗原的B细胞疫苗(neoB)”，其特征在于：

1)将肿瘤患者或供者的B细胞作为抗原提呈细胞(APC)，将肿瘤患者的个体化肿瘤新抗原(neoantigen)负载到B细胞，成为负载新抗原的B细胞疫苗(neoB)；

2)所述B细胞既可以来自患者自体，也可以来自异体供者：

3)所述B细胞可以是单纯的B细胞，也可以是包括B细胞、DC细胞在内的多种抗原提呈细胞的混合物；

4)所述肿瘤患者的个体化肿瘤新抗原负载到neoB可以由以下任一方法获得或多种方法联合完成：：

A.经肿瘤基因测序分析体细胞突变得到肿瘤新抗原基因序列，并合成新抗原基因序列得到DNA或进一步体外转录得到RNA，再将该DNA或RNA通过载体转导至B细胞内；

B.经肿瘤基因测序分析体细胞突变得到肿瘤新抗原基因序列，并合成新抗原多肽，再将多肽负载到B细胞；

C.将肿瘤细胞破碎后使其释放蛋白，与B细胞混合使其胞吞这些蛋白并提呈新抗原。

5)所述负载新抗原的过程，可以在B细胞经过体外培养而达到数量扩增之后进行，也可以在此之前进行；

6)所述负载新抗原的B细胞疫苗(neoB)，可以加入或不加入包括但不限于以下基因修饰；

A.包括PD1单抗、PDL1单抗在内的免疫检查点抑制剂；

B.包括IL7、CCL19在内的CC趋化因子、CXC趋化因子、C趋化因子以及CX3C趋化因子的一种或多种趋化因子。

2.一种预防性或治疗性细胞疫苗或包含细胞疫苗的药物组合，其特征在于，在所述细胞疫苗或药物组合研发、生产、制备、应用的任意一个过程中使用了权利要求1中所述的免疫细胞制备方法，或对使用权利要求1中所述方法制备出的细胞进行扩增或进行其他实验方法的加工处理，及其在治疗药物、治疗方法的任意一种衍生应用。

3.如权利要求2所述的预防性或治疗性细胞疫苗免疫细胞治疗药物或药物组合，其特征在于，所述药物或药物组合在任意癌种或病种、任意肿瘤分期的预防或抗肿瘤治疗中的应用，并且在给药方式上给予反复多次输注。

4.一种免疫细胞治疗药物或药物组合，其特征在于：

1)该药物或药物组合包含个体化肿瘤特异性T细胞，并将个体化肿瘤特异性T细胞与权力要求2所述细胞疫苗联合使用；

2)所述个体化肿瘤特异性T细胞可以由以下任一方法制备而得：

A.从肿瘤组织中分离肿瘤浸润T淋巴细胞(TILs)而得，或在此TILs上加入有助其克服肿瘤微环境障碍或有助其数量扩增的基因修饰而得；

B.将负载肿瘤个体化新抗原的DC细胞或B细胞或其他有抗原提呈功能的细胞，与外周血来源的T细胞或肿瘤来源的TIL在体外混合或共培养，筛选激活的新抗原特异性T细胞(neoT)而得，或在此neoT细胞上加入有助其克服肿瘤微环境障碍或有助其数量扩增的基因修饰，构建增强型新抗原反应性T细胞(Enhanced neoantigen recognizing T cells，ENT)而得，其中所述外周血来源的T细胞可以来自经过或未经过权利要求2所述疫苗诱导的患者或供者；

3)所述将个体化肿瘤特异性T细胞与权力要求2所述细胞疫苗联合使用，是指个体化肿瘤特异性T细胞与权力要求2所述细胞疫苗二者在体内的作用时间窗存在重叠，利用neoB在体内进一步激活所输注的TIL或neoT或ENT这类个体化肿瘤特异性T细胞，使其进一步扩增，二者可以同时输注，也可以不同时输注。

5.如权利要求4所述的免疫细胞治疗药物或药物组合，其特征在于，所述药物或药物组合在任意癌种或病种、任意肿瘤分期的抗肿瘤治疗中的应用。