[发明专利]一种检测谷胱甘肽的方法和硫金复合物的应用有效
申请号: | 201810217418.6 | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108444963B | 公开(公告)日: | 2019-09-10 |
发明(设计)人: | 刘卓靓;王建方;陶呈安;王芳;柳天雄;黄坚;李玉姣;阳绪衡 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军国防科技大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 何为;蒋尊龙 |
地址: | 410072 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金复合物 谷胱甘肽 孵育 检测 种检测 荧光基团标记 氯金酸溶液 荧光光谱仪 传感界面 多肽溶液 抗体识别 灵敏检测 荧光信号 灵敏度 传感 构建 巯基 应用 强弱 响应 | ||
1.一种检测谷胱甘肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将氯金酸溶液与带有巯基的多肽溶液混合,反应1—3min,得到含硫金复合物的溶液;
(2)将步骤(1)的含硫金复合物的溶液与荧光基团标记的DNA探针孵育,孵育条件为:在温度20—40℃、pH值为中性的条件下孵育1—3min;得到硫金复合物-DNA探针;
(3)在步骤(2)得到的硫金复合物-DNA探针中加入不同浓度的谷胱甘肽,用荧光光谱仪检测,根据荧光信号的强弱实现对谷胱甘肽的检测。
2.如权利要求1的方法,其特征在于,在pH值为中性条件下,所述多肽为带正电的多肽。
3.如权利要求1的方法,其特征在于,所述多肽为等电点为8—12的多肽。
4.如权利要求1的方法,其特征在于,所述多肽为精氨酸-半胱氨酸-谷氨酸构成的三肽。
5.如权利要求1的方法,其特征在于,步骤(1)中氯金酸溶液的浓度为0.5—2mmol/L;步骤(1)中多肽溶液的浓度为1—4mmol/L。
6.如权利要求1的方法,其特征在于,步骤(1)中氯金酸溶液与多肽溶液等体积混合。
7.如权利要求1的方法,其特征在于,步骤(3)中选取荧光光谱仪的激发波长为450nm—490nm。
8.一种硫金复合物-DNA探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将氯金酸溶液与带有巯基的多肽溶液混合,反应1—3min,得到含硫金复合物的溶液;
(2)将步骤(1)的含硫金复合物的溶液与荧光基团标记的DNA探针孵育,孵育条件为:在温度20—40℃、pH值为中性的条件下孵育1—3min;得到硫金复合物-DNA探针。
9.权利要求8所述的制备方法获得的硫金复合物-DNA探针在检测谷胱甘肽中的应用。
10.硫金复合物在检测谷胱甘肽中的应用,所述硫金复合物是将氯金酸溶液与带有巯基的多肽溶液混合,反应1—3min后得到。
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