[发明专利]一种苏沃雷生关键中间体的酶法制备方法

权利要求书

1.一种苏沃雷生中间体式（3）化合物（5-氯-2-((R)-5-甲基-[1,4]二氮杂环庚-1-基)苯并恶唑）的酶法制备方法，其特征在于：

利用亚胺还原酶催化式（1）化合物（4-[(2-氨基乙基)(5-氯-2-苯并恶唑基)氨基]-2-丁酮）或其盐，或式（2）化合物（5-氯-2-(5-甲基-2,3,6,7-四氢-1H-[1,4]二氮杂环庚-1-基)苯并恶唑）或其盐不对称还原制备式（3）化合物，反应式如下：

；

其中，所述亚胺还原酶为来源于Streptomyces thermolilacinus的亚胺还原酶StIR，其氨基酸序列为WP_023587323.1或来源于Kribbella catacumbae的亚胺还原酶KcIR，其氨基酸序列为WP_020388085.1或来源于Streptomyces iranensis的亚胺还原酶SiIR，其氨基酸序列为WP_044567941.1或来源于Leishmania major strain Friedlin的亚胺还原酶LmIR，其氨基酸序列为CAJ03998.1或来源于Methylocaldum szegediense的亚胺还原酶MsIR，其氨基酸序列为WP_026609689.1或来源于Microbulbifer的亚胺还原酶MbIR，其氨基酸序列为WP_067084177.1。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述亚胺还原酶是重组表达该酶的转化体培养物或重组表达该酶转化体培养物离心分离后的转化体细胞或转化体细胞加工制品。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述转化体细胞加工制品是由转化体细胞得到的提取物、或通过对提取物中的亚胺还原酶进行分离和/或纯化得到的分离产品，或者通过固定化转化体细胞或提取物或转化体的分离产品而得到的固定化制品。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应式的pH值为6.5～9.0。

5.如权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述反应式的pH值为7.0；反应温度为20～40℃。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述反应温度为30℃；反应时间为10-40h。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述反应时间为24h。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应式的底物浓度为5～100g/L。

9.如权利要求1或8所述的方法，其特征在于，所述反应式的底物浓度为50～100g/L。