[发明专利]一种检测食品中卡那霉素残留量的试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种检测食品中卡那霉素残留量的试剂盒，包括试纸条和缓冲液，其特征在于：

所述试纸条包括底板和底板上依次连接的样品垫、反应膜和吸水垫；所述反应膜上设有以卡那霉素特异性适配体DNA修饰的检测线和控制线，所述检测线设置于控制线与样品垫之间，所述特异性适配体DNA序列如SEQ ID NO 01所示；所述样品垫上修饰有荧光标记DNA，其序列如SEQ ID NO 01所示，所述荧光标记DNA在5’端修饰有荧光基团；

所述缓冲液包括缓冲液A和缓冲液B；

所述缓冲液A为pH＝4.1～5.0的10mM磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液；

所述缓冲液B为0.8～1.2mM EDTA、0.8～1.2M NaCl和质量浓度0.05％～0.1％Tween-20的8～12mM PBS缓冲液，所述缓冲液B的pH 7.2～7.6；所述PBS组成为氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。

2.根据权利要求1所述的一种检测食品中卡那霉素残留量的试剂盒，其特征在于：所述荧光标记DNA浓度为8～12μM，体积为8～12μL。

3.根据权利要求1所述的一种检测食品中卡那霉素残留量的试剂盒，其特征在于：所述特异性适配体DNA为以卡那霉素为模板合成的DNA片段，所述DNA片段溶液浓度为75～85μM，体积为0.4～0.8μL。

4.根据权利要求1所述的一种检测食品中卡那霉素残留量的试剂盒，其特征在于：所述检测线和控制线为与试纸条长边相垂直的条带状，所述控制线设置于靠近吸水垫的一侧，所述检测线设置于控制线与样品垫之间，所述检测线与控制线间距0.3～0.5cm。

5.一种食品中卡那霉素残留量的检测方法，采用所述权利要求1～4任一项所述的试剂盒，其特征在于，包括如下步骤：

(1)样品预处理：将液体食品样品离心处理后，用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液溶液稀释上清液10～20倍，得到待检样品液；

(2)加样：将试纸条的样品垫与待检样品液接触，平放试剂盒，使待待检样品液由样品垫端向吸水垫端流动，静止3～5分钟；

(3)荧光检测：将试纸条进行荧光检测，检测时的激发波长为490～495nm，发射波长为515～520nm；

(4)分析：检测结果包括阳性、阴性和无效，检验人员依据检测结果可判定卡那霉素残留量是否超标；

①阳性：当检测线显示出绿色条带，而控制线显色，判为阳性，用“+”表示；

②阴性：当检测线显示出绿色条带，而控制线不显色，判为阴性，用“-”表示；

③无效：当检测线不显示出绿色条带，则无论控制线是否显示出绿色条带，试纸均失效。

6.根据权利要求5所述的一种食品中卡那霉素残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)将试纸条插入待检样品液中，控制插入部分在样品垫的1/3。

7.根据权利要求5所述的一种食品中卡那霉素残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)取100～200μL待检样品液滴加于试纸条的样品垫顶端。