[发明专利]一种含硒植物蛋白的提取方法在审
申请号: | 201810234022.2 | 申请日: | 2018-03-21 |
公开(公告)号: | CN108546280A | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 田欢;魏昌华;鲍征宇 | 申请(专利权)人: | 中国地质大学(武汉) |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/30;C07K1/36 |
代理公司: | 武汉知产时代知识产权代理有限公司 42238 | 代理人: | 冯必发;金慧君 |
地址: | 430074 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 含硒植物 高速冷冻离心机 饱和盐溶液 蛋白 析出 含硒蛋白 提取剂 透析 预冷 沉淀 预处理 提取植物蛋白 植物性蛋白 蛋白沉淀 蛋白溶液 冷藏保存 取上清液 完全溶解 液体转移 植物蛋白 粗蛋白 上清液 提取液 透析袋 振荡 抽滤 复溶 加边 滤膜 下层 水系 | ||
1.一种含硒植物蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.预处理遏蓝菜,得到高聚硒的粉末样品;
S2.向粉末样品中加入5-15倍体积的提取剂,置于25℃恒温水浴振荡器中振荡30-90min,振荡速率为200r/min,混合均匀,抽滤,取上清液,过5μm水系滤膜,得到提取液,4℃冷藏保存;
S3.调节提取液的pH为3.5,并搅拌均匀,加入0.4-0.8倍提取液体积的预冷的饱和盐溶液,边加边搅拌,4℃静置,至粗蛋白沉淀析出;
S4.将析出粗蛋白沉淀的提取液置于高速冷冻离心机中离心10min,温度为4℃,离心速率为10000r/min,弃上清液,得到下层蛋白沉淀;
S5.向下层蛋白沉淀中再次加入提取剂复溶,并搅拌至完全溶解,得到纯化的蛋白溶液;
S6.将蛋白溶液转移至透析袋中,封口,置于超纯水中进行透析24h,期间每隔6小时换一次超纯水;
S7.检验是否透析完全,若未透析完全,重复步骤S6,若透析完全,将透析袋中的液体转移出来,则得到含硒蛋白溶液,4℃保存;
S8.调节含硒蛋白溶液的pH为3.5,并搅拌均匀,加入0.4-0.8倍含硒蛋白溶液体积的预冷的饱和盐溶液,边加边搅拌,4℃静置,至含硒蛋白沉淀析出;
S9.高速冷冻离心机离心10min,温度为4℃,离心速率为10000r/min,弃上清液,得到下层含硒蛋白沉淀,即得到含硒植物蛋白。
2.根据权利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法,其特征在于,所述步骤S1中,取遏蓝菜的地上部分,洗净,在50℃烘干至恒重,粉碎,过100目筛,即得到高聚硒的粉末样品。
3.根据权利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法,其特征在于,所述提取剂为超纯水、0.1mo/L NaOH溶液、0.1mo/L HCl溶液、0.5mol/L NaCl或0.1mol/L磷酸盐缓冲液,磷酸盐缓冲液的pH为6.6-7.4。
4.根据权利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法,其特征在于,所述步骤S3和S8中,用醋酸调节pH,饱和盐溶液为饱和硫酸铵溶液。
5.根据权利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法,其特征在于,所述步骤S5中,向下层蛋白沉淀中再次加入提取剂复溶,并用玻璃棒搅拌,若无法完全溶解,则离心,去除不溶物。
6.根据权利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法,其特征在于,所述步骤S7中,取透析液2ml,用氯化钡溶液检验是否透析完全,无沉淀产生则透析完全,有沉淀产生则未透析完全。
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