[发明专利]一种含硒植物蛋白的提取方法

说明书

本发明公开了一种含硒植物蛋白的提取方法，包括预处理遏蓝菜；加入提取剂，振荡，抽滤，取上清液，过水系滤膜，得到提取液，冷藏保存；调节pH，加入预冷的饱和盐溶液，边加边搅拌，静置，至粗蛋白沉淀析出；高速冷冻离心机中离心弃上清液，得到下层蛋白沉淀；再次加入提取剂复溶，并搅拌至完全溶解，得到纯化的蛋白溶液；透析；若透析完全，将透析袋中的液体转移出来，则得到含硒蛋白溶液；调节pH,加入预冷的饱和盐溶液静置，至含硒蛋白沉淀析出；高速冷冻离心机离心，即得到含硒植物蛋白。本发明基于遏蓝菜提取植物蛋白，显著提高了植物蛋白的提取率，以及植物性蛋白中的硒含量。

技术领域

本发明涉及蛋白的提取方法，尤其涉及一种含硒植物蛋白的提取方法。

背景技术

蛋白质是人体和动物生活所必须的营养成分，包括植物性蛋白和动物性蛋白。硒为动物和人体必需的微量元素之一，在土壤-植物-人体系统中，它最初来自于土壤，经过植物光合作用，最终主要以硒氨基酸和硒蛋白形式储存于植物体内，再通过食物链进入人体，因此含硒蛋白是人体补硒的重要的营养物质。

目前植物性硒蛋白的提取技术很多，包括三氯乙酸-丙酮沉淀(TCA)法、E-TCA(提取液添加了EGTA)法、酚提法、碱提法、酸提法和水提法等。提取蛋白质首先要将蛋白质溶解出来，综合内外因素的影响，将细胞内蛋白质提取出来，再用沉淀方法(如盐析、层析、超滤、等电点等)分离提取液中蛋白质，即得粗蛋白产品。然而，对于含硒蛋白的提取技术研究却不多，而且有关技术参数差异较大，众说纷纭。有机溶剂法提取蛋白应用较为广泛，具有沉淀蛋白质分辨力高、提取杂质较少、提取效率高的优点，但却存在高浓度有机溶剂易使蛋白质变性失活、提取出的蛋白无法溶解、有机试剂难去除和方法不可逆等缺点。水提法提取条件温和，环境危害小，蛋白色泽正常，其活性变化不大，但对于不同的植物中蛋白的性质，水提法的提取效率不同，局限性较大，是否适用于富硒植物含硒蛋白的提取，依然存在疑问。与传统的水溶液提取法相比，酶法提取和反应条件温和、选择性高、蛋白质提取纯度较高、产品中有毒物质含量低，但通过碱法与酶提取法对照实验却发现，采用两种方法提取蛋白质的提取率差异较大，碱法提取率要高于酶提法。碱提法具有工艺简单、成本低、分离效率较高的优点，但该方法受限于植物种类，使蛋白质提取效率或高或低，并且提取时间长，提取温度高，易使蛋白质发生失活与变性。盐溶法的应用也较为广泛，但在植物硒蛋白的提取方面效果欠佳，且盐溶性蛋白硒含量也较低。综上，如何从富硒植物中提取出更多的含硒蛋白，如何使提取蛋白中硒含量更高是当前含硒蛋白提取领域关注的核心问题。

遏蓝菜是一种超聚硒植物，而且它能够从土壤中有效的吸收并累积大量的硒元素，并以硒氨基酸形式保存在其蛋白组织中，因此遏蓝菜是一种用于提取植物性含硒蛋白的天然绿色原料。然而有关含硒蛋白提取方面的专利技术极为欠缺，遏蓝菜中水溶性蛋白含量高，且水溶性蛋白中硒含量也多，因此，研发出一种适合超聚硒植物遏蓝菜含硒蛋白提取的方法是十分重要的。

发明内容

有鉴于此，本发明的实施例提供了一种基于遏蓝菜提取植物蛋白，且提取率高，提取蛋白的硒含量大的含硒植物蛋白的提取方法。

本发明的实施例提供一种含硒植物蛋白的提取方法，包括以下步骤：

S1.预处理遏蓝菜，得到高聚硒的粉末样品；

S2.向粉末样品中加入5-15倍体积的提取剂，置于25℃恒温水浴振荡器中振荡30-90min，振荡速率为200r/min，混合均匀，抽滤，取上清液，过5μm水系滤膜，得到提取液，4℃冷藏保存；

S3.调节提取液的pH为3.5，并搅拌均匀，加入0.4-0.8倍提取液体积的预冷的饱和盐溶液，边加边搅拌，4℃静置，至粗蛋白沉淀析出；

S4.将析出粗蛋白沉淀的提取液置于高速冷冻离心机中离心10min，温度为4℃，离心速率为10000r/min，弃上清液，得到下层蛋白沉淀；

S5.向下层蛋白沉淀中再次加入提取剂复溶，并搅拌至完全溶解，得到纯化的蛋白溶液；