[发明专利]一种川牛膝药材的检测方法

权利要求书

1.一种川牛膝药材的检测方法，其特征在于：所述方法是采用HPLC指纹图谱进行检测的，包括如下操作步骤：

(1)供试品溶液制备：取待检药材，提取，滤过，取续滤液，即得。

(2)吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：以乙腈为流动相A，以0.1-0.3％磷酸水溶液为流动相B。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述供试品溶液制备方法为：取待检药材粉末，加甲醇水溶液提取，滤过，取续滤液，即得；

所述提取为超声提取，超声提取时间为0～2小时，优选地，超声时间为1小时；

所述甲醇水溶液的浓度是30～60％；和/或，所述甲醇水溶液加入量是药材粉末的5～80v/w倍。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述甲醇水溶液的浓度是40～50％；和/或，所述甲醇水溶液加入量是药材粉末的10～40v/w倍；优选地，所述甲醇水溶液的浓度是45％；和/或，所述甲醇水溶液加入量是药材粉末的20v/w倍。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述流动相B为0.2％磷酸水溶液，采用梯度洗脱，洗脱程序为：

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述高效液相色谱法中检测波长为多波长切换：0～15min 220nm，15～20min 200nm，20～25min 250nm，25～90nm220nm，90～109min 250nm，109～116min 200nm，116～170min 220nm。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述色谱柱为AgilentZORBAX SB-C18柱，色谱柱规格为250mm×4.6mm，5μm；所述高效液相色谱法中流速0.5-1.5mL/min，进样量10-40μL，柱温15-30℃；优选地，所述高效液相色谱法中流速1.0mL/min，进样量20μL，柱温20℃。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：比较样品HPLC图谱与川牛膝HPLC指纹图谱的相似度和/或特征色谱峰差异鉴别川牛膝真伪。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于：所述川牛膝HPLC指纹图谱有18个共有色谱峰，以9号峰为参照峰，各共有色谱峰的相对保留时间依次为：0.037、0.055、0.064、0.149、0.210、0.259、0.484、0.722、1.000、1.030、1.082、1.112、1.146、1.153、1.170、1.279、1.281、1.289，各色谱峰相对保留时间允许偏差为±5％；

优选地，按保留时间升序排列，各色谱峰分别是：1号峰：保留时间3.8min；2号峰：保留时间5.7min；3号峰：保留时间6.6min；4号峰：保留时间15.3min；5号峰：保留时间21.6min；6号峰：保留时间26.6min；7号峰：保留时间49.7min；8号峰：保留时间74.1min；9号峰：保留时间102.6min；10号峰：保留时间105.7min；11号峰：保留时间111.0min；12号峰：保留时间114.2min；13号峰：保留时间117.7min；14号峰：保留时间118.4min；15号峰：保留时间120.0min；16号峰：保留时间131.2min；17号峰：保留时间131.5min；18号峰：保留时间132.3min，各色谱峰保留时间允许偏差为±0.5min。