[发明专利]一种川牛膝药材的检测方法

说明书

本发明公开了一种川牛膝药材的检测方法，采用高效液相色谱法测定样品HPLC图谱，并比较所得图谱与川牛膝HPLC指纹图谱的相似度和特征峰差异。本发明检测方法运用多波长切换技术，解决了多组分因吸收波长差异大而无法在单一波长下全部检出的矛盾，本发明检测方法用于川牛膝药材的真伪鉴别，灵敏度高、高效准确。

技术领域

本发明涉及一种川牛膝药材的检测方法，具体涉及一种川牛膝的指纹图谱检测方法，属于药物检验领域。

背景技术

川牛膝为苋科植物川牛膝(Cyathula officinalis Kuan)的干燥根，收载于《中国药典》2015版一部，有逐瘀通经，通利关节，利尿通淋之功效。

川牛膝是著名川产道地药材，主产于四川金口河区、宝兴县和湖北恩施市、宣恩县等地。川牛膝为多组分复杂体系，现行《药典》对川牛膝的质量控制仅测定川牛膝中杯苋甾酮含量，单一组分的测定难以反映川牛膝多组分体系下的整体质量，且川牛膝常见伪品头花杯苋和杂牛膝不仅外观形态上与川牛膝相似，其杯苋甾酮含量也能达到《药典》限量指标，现行《药典》方法难以将川牛膝与伪品、掺伪品有效的鉴别开来。市场上川牛膝造假多以川牛膝中掺混头花杯苋和/或杂牛膝出售为主，严重地影响了川牛膝的临床用药安全和道地药材的开发利用。

急需一种能准确鉴别川牛膝正品、川牛膝伪品和掺伪品川牛膝的鉴别方法。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种川牛膝药材的检测方法。

本发明川牛膝药材的检测方法，采用HPLC指纹图谱进行检测，包括如下操作步骤：

(1)供试品溶液制备：取待检药材，提取，滤过，取续滤液，即得。

(2)吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：以乙腈为流动相A，以0.1-0.3％磷酸水溶液为流动相B。

其中，步骤(1)中所述供试品溶液制备方法为：取待检药材粉末，加甲醇水溶液提取，滤过，取续滤液，即得。

进一步地，所述甲醇水溶液的浓度是30～60％；和/或，所述甲醇水溶液加入量是药材粉末的5～80v/w倍。

进一步地，所述甲醇水溶液的浓度是40～50％；和/或，所述甲醇水溶液加入量是药材粉末的10～40v/w倍。

进一步地，所述甲醇水溶液的浓度是45％；和/或，所述甲醇水溶液加入量是药材粉末的20v/w倍。

其中，步骤(1)中，所述提取为超声提取，超声提取时间为0～2小时。

进一步地，所述超声提取时间为1小时。

其中，步骤(2)中，所述色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱。

进一步地，所所述色谱柱规格为250mm×4.6mm，5μm。

其中，步骤(2)中所述流动相B为0.2％磷酸水溶液。

其中，步骤(2)中所述高效液相色谱法采用梯度洗脱，洗脱程序为：

其中，步骤(2)中所述高效液相色谱法中检测波长为多波长切换：0～15min220nm，15～20min 200nm，20～25min 250nm，25～90nm 220nm，90～109min 250nm，109～116min 200nm，116～170min 220nm。

其中，步骤(2)中所述高效液相色谱法中流速0.5-1.5mL/min；进样量10-40μL；柱温15-30℃。