[发明专利]一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法

说明书

本发明属于兽医诊断领域，尤其是一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法，针对现有对内部杂菌的灭菌效果差，进而对鸡白痢染色凝集抗原的纯净度产生不利影响的问题，现提出如下方案，其制备方法包括以下步骤：S1：将鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79‑6、C79‑11‑S11和SP8441分别利用营养肉汤培养基进行复苏繁殖，营养肉汤培养基的培养时间设置为20‑23h，得到鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79‑6、C79‑11‑S11和SP8441所对应的培养液，本发明中的一级种子液和二级种子液均进行不同的灭菌操作，且在二级种子液再次进行灭菌之前新增了筛选操作，使得鸡白痢染色凝集抗原的灭菌效果和纯净度均得到了极大的提高。

技术领域

本发明涉及兽医诊断技术领域，尤其涉及一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法。

背景技术

鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的传染性疾病，世界各地均有发生，是危害养鸡业最严重的疾病之一，鸡白痢的主要症状：雏鸡表现不吃饲料，怕冷，身体蜷缩，翅膀下垂，精神沉郁或昏睡，排白色粘稠或淡黄、淡绿色稀便，肛门有时被硬结的粪块封闭，呼吸困难；成年鸡表现精神萎靡，排黄绿色或蛋清样稀便，主要病变可见肝脏、脾脏肿大、脆弱，有坏死点，肾脏暗红充血或苍白贫血，常出现腹膜炎变化。为了保障鸡的正常生长，通常使用多价染色平板凝集试验抗原进行检测，但是该抗原在实际使用中存在敏感度低、诊断速度慢和凝集图像不清晰的问题。

为了解决多价染色平板凝集试验抗原所存在敏感度低、诊断速度慢和凝集图像不清晰的问题，人们提出了专利公布号为“CN104789500A”的一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法和应用，该专利具有敏感度高、诊断速度快和凝集图像清晰的优点，但是该专利中仅通过灭菌纱布进行过滤灭菌处理，使得灭菌效果较差，进而对鸡白痢染色凝集抗原的纯净度产生不利的影响。

为了解决专利公告号“CN104789500A”的一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法和应用所存在的问题，提出了一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法。

发明内容

本发明提出的一种鸡白痢染色凝集抗原及其制备方法，解决了对内部杂菌的灭菌效果差，进而对鸡白痢染色凝集抗原的纯净度产生不利影响的问题。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种鸡白痢染色凝集抗原，由鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79-6、 C79-11-S11和SP8441制成，所述鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79-6、 C79-11-S11和SP8441均在中国典型培养物保藏中心保藏。

优先的，所述鸡白痢染色凝集抗原含有的细胞浓度为1.5× 10¹⁰CFU/ml，且其中鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79-6、C79-11-S11 和SP8441的细胞数量分别为15％、25％、55％和5％。

本发明还提出了一种鸡白痢染色凝集抗原的制备方法，包括以下步骤：

S1：将鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79-6、C79-11-S11和SP8441 分别利用营养肉汤培养基进行复苏繁殖，营养肉汤培养基的培养时间设置为20-23h，得到鸡白痢沙门氏菌菌种S0808、C79-6、C79-11-S11 和SP8441所对应的培养液；

S2：S1中所述的四种不同的培养液分别接种在SS琼脂培养基中， SS琼脂培养基所接种的培养液均在恒温箱的内部放置44-46h，且恒温箱内部的温度设置为38-40℃；

S3：S2中所述的SS琼脂培养基分别利用生理盐水洗下菌苔，得到一级种子液，然后一级种子液利用紫外线照射灯，在34-36℃下进行照射10-20min；

S4：S3中所述的一级种子液分别接种在SS琼脂培养基中，SS琼脂培养基所接种的培养液均在恒温箱的内部放置44-46h，且恒温箱内部的温度设置为38-40℃；