[发明专利]伤科黄水制剂的质量控制方法

说明书

伤科黄水制剂的质量控制方法，包括以下步骤：(1)称取盐酸黄柏碱、盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、栀子苷和绿原酸，加无水甲醇或甲醇水溶液，制成对照品溶液；(2)取待测定的伤科黄水制剂的内容物，加入无水甲醇或甲醇水溶液溶解，过滤并取续滤液作为供试品溶液；(3)分别取所述对照品溶液与所述供试品溶液1～5μL，注入液相色谱‑质谱的联用仪器进行检测，通过计算定量色谱图获得包括黄柏碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、栀子苷和绿原酸的含量；本发明使原本欠缺的定量评价指标能够用一次定量测定来完成；该方法的定量色谱图能表明该波峰分离良好，因而方法鉴别、快捷、准确。

技术领域

本发明涉及质量控制技术领域，尤其涉及伤科黄水制剂的质量控制方法。

背景技术

伤科黄水是申请人开发的产品，于2000年获得相关专利(专利公告号：96123078.9)，但是因其是临床验方，一直以来有关该品种质量评价的研究工作并未深入开展，导致制剂生产工艺相对粗放，质量标准较低，临床疗效难以控制。尤其值得注意的是，该制剂复方组成复杂，物质基础不明，在质量标准方面目前仍以外观感官判断和定性鉴别(薄层色谱)为主，尚缺乏特征明确的指标性成分，质量评价体系亟待完善。

我们结合伤科黄水的药理作用与理化性质等，利用液相色谱、质谱等技术对伤科黄水的主要组成成分及含量进行了研究。通过液相色谱串联傅里叶变换质谱(LC-FTICR-MS)技术，我们分析了伤科黄水主要成分的一级质谱和二级质谱，根据一级母离子分子量(极高分辨率为0.0001Da)，以及相应的二级碎裂数据与对照品、数据库或文献对比，对该制剂进行了定性检测。结果共发现并确证了复方中20种成分，还有大量物质母离子分子量能够匹配，但是由于色谱图不够理想，未收录进结果。

发明内容

本发明的目的在于提出采用LC-MS和HPLC技术，建立了小檗碱、表小檗碱、巴马汀、药根碱、黄连碱、黄柏碱、绿原酸和栀子苷成分的含量测定方法，并进行了方法学考察。经过反复比较，发现LC-MS可以同时测定伤科黄水中的小檗碱、表小檗碱、巴马汀、药根碱、黄连碱、黄柏碱、绿原酸、栀子苷等共8种成分含量，结果稳定可靠，可以作为伤科黄水的质控指标

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

伤科黄水制剂的质量控制方法，伤科黄水制剂的成份包括：黄连、黄柏、栀子、紫草、薄荷和白矾；所述质量控制方法包括以下步骤：

(1)称取盐酸黄柏碱、盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、栀子苷和绿原酸，加无水甲醇或甲醇水溶液，制成对照品溶液；

(2)取待测定的伤科黄水制剂的内容物，加入无水甲醇或甲醇水溶液溶解，过滤并取续滤液作为供试品溶液；

(3)分别取所述对照品溶液与所述供试品溶液1～5μL，注入液相色谱-质谱的联用仪器进行检测，分别获得对所述对照品溶液和所述供试品溶液中黄柏碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、栀子苷和绿原酸共8种成份的定量色谱图；所述对照品溶液与所述供试品溶液在相同的位置上出峰；并通过计算得出包括黄柏碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、栀子苷和绿原酸的含量。

更进一步说明，质谱的条件中，黄柏碱质荷比为342.3→192.1，其中去簇电压80～120，碰撞能30～50；

药根碱的质荷比为339.3→323.2或339.3→295.2，其中去簇电压80～120，碰撞能30～50；

表小檗碱的质荷比为336.1→320.2或336.1→292.1，其中去簇电压80～120，碰撞能30～50；

黄连碱的质荷比为320.2→292.0，其中去簇电压80～120，碰撞能30～50；

巴马汀的质荷比为352.→336.1或352.→308.2，其中去簇电压80～120，碰撞能30～50；