[发明专利]一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用，所述嵌合抗原受体免疫细胞表面表达抗PD‑L1嵌合抗原受体，所述抗PD‑L1嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括PD‑1胞外段及PD‑1信号肽。本发明通过在嵌合抗原受体免疫细胞表面表达抗PD‑L1嵌合抗原受体，避免了因免疫细胞表面PD‑1与肿瘤细胞表面PD‑L1结合而引发的免疫细胞枯竭，实现了将PD‑1通路引发的抑制信号转变为免疫细胞激活信号，显著增强了嵌合抗原受体免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用。

背景技术

嵌合抗原受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T)免疫疗法是近年来热门的血液性肿瘤的免疫治疗方法，主要通过嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)进行癌细胞抗原的识别和杀伤。近年来，CAR-T免疫疗法在多个临床试验中取得极佳的治疗效果。报道称，经过CAR-T免疫疗法，90％的急性淋巴细胞白血病患者得到完全缓解(S.L.Maude et al.Chimeric antigen receptor T cells for sustained remissionsin leukemia.Engl.J.Med.,371,1507-1517(2014))。靶向CD19抗原治疗B淋巴细胞白血病和淋巴瘤的成功振奋人心，2017年美国食品药品监督局相继批准诺华和吉利的治疗白血病CAR-T细胞产品上市。

肺癌是一种常见的肺部恶性肿瘤，发病率和死亡率居所有恶性肿瘤之首，近50年来已成为全球范围内最严重的癌症类型之一。非小细胞肺癌(non-small-cell lungcancer，NSCLC)占肺癌总人数的85％，目前针对非小细胞肺癌的治疗方案主要为手术、放疗、化疗、中药治疗和靶向治疗。我国还未能全面普及居民的定期肿瘤筛查，约80％的肺癌患者在确诊时已进入晚期，错过了最佳治疗期，治愈率低；此外，非小细胞肺癌对于放疗、化疗的敏感性差，治疗效果欠佳。针对EGFR、ALK等基因突变的靶向性治疗只能用于存在上述基因突变的肺癌患者，受众人数少，且患者容易产生耐药性。因此，非小细胞肺癌需要更为强效的治疗手段。

肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是一种常见的恶性肿瘤，因其死亡率高、病程短，被称为“癌症之王”。治疗肝癌最有效的方法是手术，对于无法进行手术的患者，可采用区域化疗栓塞和放射介入治疗。尽管如此，肝癌患者的5年生存率仅10％，探索更为有效的治疗手段迫在眉睫。

CAR-T免疫疗法在治疗白血病方面的成功，让我们自然联想到将其应用于NSCLC和HCC的治疗。应用CAR-T免疫疗法治疗NSCLC和HCC，可以采用的肿瘤细胞表面抗原包括间皮素(Mesothelin，meso)、前列腺干细胞抗原(prostate stem cell antigen，PSCA)、粘蛋白(mucin 1，MUC1)、人类表皮生长因子受体2(human epidermal receptor 2，HER2)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖(glypican 3，GPC3)。

目前已开展多项针对上述靶点的CAR-T免疫疗法临床试验，然而未取得有效进展，主要是因为实体肿瘤细胞和免疫细胞表面会表达细胞程序性死亡配体1(programmingdeath ligand 1，PD-L1)和细胞程序性死亡配体2(programming death ligand 2，PD-L2)，PD-L1和PD-L2会与CAR-T细胞表面的细胞程序性死亡受体1(programming death 1，PD-1)结合，引发胞内抑制性信号通路，导致CAR-T细胞枯竭，失去对肿瘤的杀伤能力。