[发明专利]用于检测丁酰胆碱酯酶的荧光探针及其应用

权利要求书

1.一种荧光探针在制备检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒中的用途，其特征在于，所述荧光探针为非肽类荧光探针，且所述非肽类荧光探针的结构如下式1所示：

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述非肽类荧光探针用于检测丁酰胆碱酯酶时，所述非肽类荧光探针的苯甲酰基作为识别基团，与所述丁酰胆碱酯酶结合。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述非肽类荧光探针用于检测丁酰胆碱酯酶时，所述丁酰胆碱酯酶与所述非肽类荧光探针的摩尔用量比为1μM：(1-100)μM。

4.一种检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述非肽类荧光探针和丁酰胆碱酯酶的标准品。

5.如权利要求4所述的检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒，其特征在于，还包括浓度为50-100mM的Tris-HCl缓冲溶液。

6.一种如权利要求4所述的检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

提供丁酰胆碱酯酶标准品、丁酰胆碱酯酶待测样品和非肽类荧光探针；

将所述丁酰胆碱酯酶标准品和所述非肽类荧光探针混合反应，得到荧光团反应产物；检测激发光刺激下的反应产物的荧光强度变化值随时间的变化值，获取丁酰胆碱酯酶-荧光强度变化值标准曲线，得到丁酰胆碱酯酶-荧光强度变化值线性方程；

在与所述丁酰胆碱酯酶标准品相同的检测条件下，将所述丁酰胆碱酯酶待测样品和所述非肽类荧光探针混合反应，得到荧光团反应产物；检测激发光刺激下的反应产物的荧光强度变化值，代入所述丁酰胆碱酯酶-荧光强度变化值线性方程中，计算获得所述丁酰胆碱酯酶待测样品的浓度。

7.如权利要求6所述的检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述激发光的波长为325nm，在所述激发光刺激下的所述荧光团反应产物的荧光的发射波长为460nm。

8.如权利要求6所述的检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述混合反应的条件为：温度为25-37℃，pH值为6-8，时间为5-30min。

9.如权利要求6所述的检测丁酰胆碱酯酶活性的试剂盒的使用方法，其特征在于，将所述丁酰胆碱酯酶标准品或所述丁酰胆碱酯酶待测样品与所述非肽类荧光探针混合反应的步骤，在浓度为50-100mM的Tris-HCl缓冲液中进行。

10.一种如权利要求1-3任一项所述非肽类荧光探针在丁酰胆碱酯酶检测领域的应用，其特征在于，所述应用包括所述荧光探针用于检测丁酰胆碱酯酶活性，所述荧光探针用于丁酰胆碱酯酶抑制剂或促进剂的动力学表征领域的应用。