[发明专利]用于龟纹瓢虫多样性分析的SSR引物及应用有效
申请号: | 201810252208.0 | 申请日: | 2018-03-26 |
公开(公告)号: | CN108315438B | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 张利娟;崔金杰;雒珺瑜;张帅;马妍 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
地址: | 455000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 瓢虫 多样性 分析 ssr 引物 应用 | ||
1.用于龟纹瓢虫多样性分析的SSR引物组合,其特征在于,所述SSR引物组合包括18对SSR引物,分别为pro444、pro524、pro3422、pro4078、pro3621、pro3595、pro6393、pro8136-3、pro8823、pro1546、pro1582、pro5238、pro1517、pro1600、pro523、pro322-2、pro5087和pro8461;各SSR引物的信息如下:
2.含有权利要求1所述SSR引物组合的检测试剂或试剂盒。
3.权利要求1所述SSR引物组合在龟纹瓢虫遗传多样性分析中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取待测样品的基因组DNA;
2)以提取的DNA为模板,利用所述SSR引物组合进行PCR反应;
3)分析PCR扩增产物。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤2)PCR扩增体系为:2×Taq PCRMaster Mix反应缓冲液12.5μL,10μM上、下游引物各1μL,DNA模板1-2μL,无菌水补足至25μL。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤2)PCR扩增程序为:94℃预变性3min;94℃变性1min,51-58℃退火1min,72℃延伸1min,30个循环;72℃延伸5min。
7.根据权利要求5-6任一项所述的应用,其特征在于,进行PCR扩增前,还包括用不同的荧光基团对各SSR引物的正向引物5′端进行荧光标记的步骤。
8.权利要求1所述SSR引物组合在构建龟纹瓢虫SSR指纹图谱中的应用。
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