[发明专利]一种卵巢组织的冻存保护与复苏液

权利要求书

1.一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，包括冻存保护液和复苏液，

所述的冻存保护液包括Leibovitz L-15培养基，8-10 V/V%DMSO、0.5-1.0 V/V%HSA或8-10 V/V%SSS以及5mM的氮乙酰半胱氨酸；

所述的复苏液包括：

（1）复苏液1：90V/V%DPBS，10V/V%HSA，0.5-0.8mol/L蔗糖，5mM氮乙酰半胱氨酸；

（2）复苏液2：90V/V%DPBS，10V/V%HSA，0.3-0.5mol/L蔗糖，5mM氮乙酰半胱氨酸；

（3）复苏液3：90V/V%DPBS，10V/V%HSA，0.12-0.3mol/L蔗糖，5mM氮乙酰半胱氨酸；

冻存时，冻存管中加入一定量的冻存保护液，组织块放入冻存管中，然后逐步降温进行氮液冻存，所述逐步降温进行液氮冻存的过程包括：

（1）2℃平衡，维持15min；（2）以6℃/min的速度降至-2℃；（3）以4℃/min的速度降至-4℃；（4）以2℃/min的速度降至-7.5℃；（5）以0.5℃/min的速度降至-8℃；（6）以0.5℃/min的速度降至-11.5℃；（7）以0.1℃/min的速度降至-13℃；（8）以0.3℃/min的速度降至-42℃；（9）以50℃/min的速度降至-100℃；逐步降温进行液氮冻存的过程中，温度降至-8℃时达到植冰点，此时蘸取液氮置于冻存管壁的液面处，结晶启动。

2.根据权利要求1所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，所述的冻存保护液包括Leibovitz L-15培养基，10 V/V%DMSO，1 V/V%HSA，5mM的氮乙酰半胱氨酸；

或者冻存保护液包括Leibovitz L-15培养基，10 V/V%DMSO，10 V/V%SSS，5mM的氮乙酰半胱氨酸。

3.根据权利要求1或2所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，所述的冻存保护液还包括牛磺酸，所述的牛磺酸的含量为0.5-5mM。

4.根据权利要求3所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，牛磺酸的含量为0.5-1mM。

5.根据权利要求3所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，牛磺酸的含量为0.5mM。

6.根据权利要求1-5任一所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，所述的冻存保护液还包括维生素E，所述的维生素E的含量为0.1-10mM。

7.根据权利要求6所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，维生素E的含量为3-7mM。

8.根据权利要求6所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，维生素E的含量为5 mM。

9.根据权利要求6所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，所述的复苏液还包括牛磺酸，所述的牛磺酸的含量为0.5-5mM。

10.根据权利要求9所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，牛磺酸的含量为0.5-1mM。

11.根据权利要求9所述的一种卵巢组织的冻存保护与复苏液，其特征在于，牛磺酸的含量为0.5mM。