[发明专利]一种利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法

权利要求书

1.一种利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，其特征在于由以下步骤组成：

(1)称取待检猕猴桃样品以乙酸乙酯为提取剂，按照常规预处理方法进行处理，得到待检样品提取液；

(2)将步骤(1)所得待检样品提取液加入浓度为1.5×10^-5mol/L的牛血清白蛋白溶液中，采集待检样品的淬灭荧光发射光谱；采集参数：激发和发射单色仪狭缝宽度均为3.0～10.0nm，扫描速度为200～2000nm/min，激发波长为250～290nm；在200～900nm范围内测量样品的荧光淬灭光谱，扫描间隔为0.5～2.0nm；

(3)对步骤(2)的淬灭荧光发射光谱数据进行二阶导数处理，得待测样品的导数光谱数据；

(4)将氯吡脲含量为0的猕猴桃标准样品按照上述步骤(1)～(3)的方法处理，得到标准样品的导数光谱数据；

(5)将步骤(4)所得标准样品的导数光谱数据与步骤(3)所得的待测样品导数光谱数据按照行排列组成光谱矩阵；

(6)按下式计算同步二维荧光光谱强度矩阵：

Φ＝S^TS

式中Φ为同步二维荧光光谱强度矩阵；S为步骤(5)组成的光谱矩阵，是由2行光谱数据组成，第1行光谱数据为标准样品的导数光谱数据，第2行光谱数据为待测样品的导数光谱数据；

(7)将步骤(6)所得的同步二维荧光光谱强度矩阵中主对角线301～399nm范围对应的数据提出，并代入已经训练好的BP神经网络模型，得到待测样品中氯吡脲的含量；

所述步骤(1)的预处理方法为：称取猕猴桃样品，打浆，以乙酸乙酯为提取剂，超声震荡10～30min，加入无水MgSO₄和NaCl,旋涡,静置，放入离心机中设定5000r/min离心10min，取上清液得到待检样品提取液；

所述1.5×10^-5mol/L的牛血清白蛋白溶液配制方法为：准确称取牛血清白蛋白于比色管中，用浓度为0.05mol/L、PH＝7.40的Tris-HCl缓冲溶液溶解，放入超声波中进行混匀。

2.根据权利要求1所述的利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，其特征在于，步骤(2)中利用荧光光谱法采集待检样品的淬灭荧光发射光谱的参数为：激发和发射单色仪狭缝宽度均为5nm，扫描速度为1000nm/min，激发波长为280nm；在285～459nm范围内测量每个样品的荧光淬灭光谱，扫描间隔为1nm。

3.根据权利要求1所述的利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的二阶导数处理采用Orign8.0软件进行处理。

4.根据权利要求1所述的利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，其特征在于：所述步骤(7)中的BP神经网络模型是采用Matlab软件NNTOOL库进行BP神经网络模型的训练。

5.根据权利要求4所述的利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，其特征在于：所述BP神经网络模型的具体训练方法为：采集N个含有不同浓度氯吡脲的猕猴桃样品，每个样品分成两部分，一部分按步骤(1)～(7)进行处理，得到的数据作为输入数据集，另一部分依据SN/T3643-2013方法测定氯吡脲含量，得到的数据作为输出数据集，选择部分组数据作为训练集，用于训练BP神经网络，将剩余组数据作为模型测试集，用于测试所建立BP神经网络模型识别精度，进而完成BP神经网络模型的训练。