[发明专利]一种利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法

说明书

本发明涉及一种利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，其利用氯吡脲对牛血清蛋白荧光的淬灭作用结合二维相关光谱和神经网络检测猕猴桃中氯吡脲的方法，而且提取同步二维荧光光谱主对角线上的数据，可反映了随外扰变化待测体系“差异性”变化信息，能够检测出微量氯吡脲含量的信息，处理简单、分析效率和准确率高，检测更为准确、快速，可广泛应用于猕猴桃中氯吡脲含量的检测，利用氯吡脲对BSA荧光的淬灭作用结合二维相关光谱和BP神经网络检测猕猴桃中氯吡脲的含量，克服了直接采用同步谱矩阵数据建模存在的冗余问题。

技术领域

本发明涉及一种利用氯吡脲对牛血清蛋白(BSA)荧光的淬灭作用结合二维相关光谱和BP神经网络检测猕猴桃中氯吡脲的方法，属于食品检测方法领域。

背景技术

猕猴桃风味独特，口感鲜美，富含维生素C、膳食纤维和多种矿物营养，并具有诸多保健功效，是当今世界备受青睐的重要水果之一。随着人们对猕猴桃深入了解和全球商业化开发的兴起，中国猕猴桃产业得到了迅速发展，栽培面积和产量均居世界第一。由于氯吡脲的生长促进作用效果优异，尤其是能促进果实膨大，因而被应用于猕猴桃上。但是猕猴桃生长过程中氯吡脲的滥用，严重影响猕猴桃的内在品质，阻碍猕猴桃产业的发展。猕猴桃生产过程中，农民一味追求产量，超剂量使用氯吡脲，果实一般增大50％左右，果实纵径变短，果蒂变宽或突出，果心变粗变空，果实生理后熟变快，货架期、贮藏期变短，很快后熟变软腐烂。研究表明，长期接触氯吡脲会引起体内蛋白质代谢紊乱、轻度肺气肿和体形消瘦，尤其对儿童和老人影响较大，长期接触也会引起体内蛋白质代谢的紊乱、肺气肿和体形消瘦。

现有的检测方法，虽然技术上成熟、精度高，但技术条件要求高、样品预处理过程复杂、耗时、检测费用高、在检测过程中需要用到大量化学试剂,易造成环境污染,难以进行现场快速、绿色检测，不适合猕猴桃中氯吡脲残留的常规检测。因此迫切需要寻找一种具有快速、准确、方便、经济、安全、低成本等特点的方法来检测猕猴桃中氯吡脲含量，以适合我国国情，满足猕猴桃生产的实际需要，推进猕猴桃产业持续健康发展。

发明内容

本发明的目的在于克服当前检测方法的不足，提供一种利用氯吡脲对BSA荧光的淬灭作用结合二维相关光谱和BP神经网络检测猕猴桃中氯吡脲的方法。

本发明是按照以下技术方案实现的:

一种利用荧光淬灭作用检测猕猴桃中氯吡脲的方法，由以下步骤组成：

(1)称取待检猕猴桃样品以乙酸乙酯为提取剂，按照常规预处理方法进行处理，得到待检样品提取液；

(2)将步骤(1)所得待检样品提取液加入浓度为1.5×10^-5mol/L的牛血清白蛋白溶液中，采集待检样品的淬灭荧光发射光谱；采集参数：激发和发射单色仪狭缝宽度均为3.0～10.0nm，扫描速度为200～2000nm/min，激发波长为250～290nm；在200～900nm范围内测量样品的荧光淬灭光谱，扫描间隔为0.5～2.0nm；

(3)对步骤(2)的淬灭荧光发射光谱数据进行二阶导数处理，得待测样品的导数光谱数据；

(4)将氯吡脲含量为0的猕猴桃标准样品按照上述步骤(1)～(3)的方法处理，得到标准样品的导数光谱数据；

(5)将步骤(4)所得标准样品的导数光谱数据与步骤(3)所得的待测样品导数光谱数据按照行排列组成光谱矩阵；

(6)按下式计算同步二维荧光光谱强度矩阵：

Φ＝S^TS

式中Φ为同步二维荧光光谱强度矩阵；S为步骤(5)组成的光谱矩阵，是由2行光谱数据组成，第1行光谱数据为标准样品的导数光谱数据，第2行光谱数据为待测样品的导数光谱数据；