[发明专利]一种快速测定液体中兽药残留及非法添加物的方法在审
申请号: | 201810259686.4 | 申请日: | 2018-03-27 |
公开(公告)号: | CN108827875A | 公开(公告)日: | 2018-11-16 |
发明(设计)人: | 焦燕妮;杨路平;姜大峰;李凤华;辛成龙;郑凤家 | 申请(专利权)人: | 山东省疾病预防控制中心 |
主分类号: | G01N21/17 | 分类号: | G01N21/17;G01N33/543 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 张宏松 |
地址: | 250100 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 添加物 中兽药 光纤生物传感器 快速检测 液体样本 残留 灵敏性 非法 生物检测领域 信号放大作用 光纤传感器 反应方式 分子物质 检测液体 快速测定 再生使用 纳米金 样本 检测 | ||
1.一种分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,包括:
a)孵育:用经纳米金颗粒标记的与兽药或非法添加物分子特异性结合的抗体或受体与待检液体混合,在便于抗体或受体与兽药或非法添加物分子反应的条件下,使抗体或受体与待检液体中的兽药或非法添加物分子充分反应形成复合物;
b)平衡:将底部带有与兽药或者非法添加物分子与载体蛋白形成的共价偶联物分子层的光纤生物生物传感器暴露于阴性样品或阴性样品与纳米金混合液,同时检测信号变化;
c)结合:将底部带有与兽药或者非法添加物分子与载体蛋白形成的共价偶联物分子层的光纤生物生物传感器暴露于孵育后的液体中,同时检测信号变化;
d)判断:根据信号变化情况,对液体中相应兽药残留或非法添加物含量进行判定。
2.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征在于是光纤生物传感器是通过光纤耦合至光源及检测器的光学元件,该元件的远离光源的一端带有与兽药或非法添加物分子与载体蛋白形成的共价偶联物。
3.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是孵育阶段的反应条件为:20℃-50℃反应1min-15min,优选37℃-45℃反应1-5min。
4.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是阴性样本与纳米金混合液中的纳米金表面被不与兽药残留或非法添加物分子发生结合反应的分子所覆盖,如:BSA、OVA等。
5.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是兽药或非法添加物与载体蛋白形成的共价偶联物分子通过疏水作用力、共价键或者分子间作用力固定于光纤生物传感器底部,优选疏水作用力。
6.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是若偶联物分子以疏水作用力固定于光纤生物传感器的底部,则偶联物的包被浓度优选50μg/ml-5mg/ml。
7.如权利要求1所述分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是结合阶段的反应条件为:20℃-50℃反应1min-15min,优选37℃-45℃反应5min。
8.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征在于,将偶联物分子固定于光纤生物传感器底部之后,应再将光纤生物传感器底部暴露于1%-5%的鱼明胶、5%-20%的海藻糖或者5%-10%的蔗糖中,暴露时间为0.5min-10min,优选用1%-5%的鱼明胶暴露1min-3min。
9.如权利要求1所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是所述纳米金颗粒的粒径为20nm-60nm。
10.如权利要求1所述分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法,其特征是纳米金通过直接或者间接标记方式与抗体或受体结合在一起形成复合物;纳米金标记与兽药或非法添加物分子特异性结合的抗体或受体的条件为1毫升纳米金与0.2μg-20μg的抗体或受体反应,优选1毫升纳米金与15μg-20μg的抗体或受体反应;非法添加物是指三聚氰胺、罗丹明B、苏丹红、孔雀石绿等在动物生产加工领域中禁用的化学物质。
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