[发明专利]一种快速测定液体中兽药残留及非法添加物的方法

说明书

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种用光纤生物传感器检测液体样本中兽药残留及非法添加物的方法。本发明从反应方式上着手，提供一种采用光纤生物传感器快速检测液体样本中兽药残留或非法添加物的方法，通过纳米金的信号放大作用将检测的灵敏性提高到一个比较高的水平。本发明方法灵敏性高，操作简单，时间短，且光纤传感器可再生使用，适合液体样本中小分子物质的快速检测。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种用光纤生物传感器检测液体样本中兽药残留及非法添加物的方法。

背景技术

随着人民生活水平的日益提高，对食品特别是动物源性食品的需求也在不断上升。而在动物生产过程中，为了追求利益最大化，大量使用兽药以及其它非法添加物等物质,这使得水产及肉蛋奶中会含过量的化学物质残留,这些物质不断积聚往往对人体产生巨大的损害。因而，对动物源性食品中存在的化学药物残留进行快速检测对于保障人民生命健康、促进贸易的发展具有重要意义。

快速检测技术作为保障食品质量安全的重要技术支撑,在食品生产、流通全过程控制和监管以及进出口贸易中发挥着越来越重要的作用。现有的快速检测动物制品中兽药残留及非法添加物的方法主要是基于抗原-抗体反应的检测技术，主要有免疫层析法和酶联免疫吸附实验(ELISA)两种。

由于抗生素、激素类以及其它非法添加物等物质均为小分子，没有更多的抗原表位，所以对这类物质进行免疫学检测时均采用竞争法进行。目前几乎所有抗生素、激素以及其它非法添加物都已经建立了免疫测定法，如CN101198872公开了一种采用免疫层析技术检测β-内酰胺类抗生素、四环素、磺胺类抗生素的方法。免疫分析法普遍具有特异性好、灵敏度高、操作方便、检测时间短、不需要大型仪器设备等优势。

生物膜干涉技术(Bio-Layer Interferometry,BLI)是在光纤生物传感器(Biosensor)底部覆盖了生物分子相容层,可以用来固定相互作用分子中的一个,形成生物膜层,当具有一定带宽的可见光入射生物膜层时,根据薄膜干涉的简化模型和光线反射折射定律,入射光线在生物膜层表面被分成两部分,形成第一部分反射光,进入生物层的透射部分在生物层的第二个界面产生反射,形成第二部分反射光。光束垂直入射时,两部分反射光形成干涉波,被光谱仪所检测。相互作用发生时,生物层厚度增加,反射光干涉光谱曲线整体向波长增加方向移动，会导致干涉曲线的漂移,这种变化可以被实时监测。文献CN1875243公开了一种基于分子相互作用的光学元件，该元件可以用于生物分子生物相互作用检测。

发明内容

本发明旨在提供一种采用生物膜干涉技术检测液体样本中兽药残留及非法添加物的方法。

一种分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法，包括：

a)孵育：用经纳米金颗粒标记的与兽药或非法添加物分子特异性结合的抗体或受体与待检液体混合，在便于抗体或受体与兽药或非法添加物分子反应的条件下，使抗体或受体与待检液体中的兽药或非法添加物分子充分反应形成复合物；

b)平衡：将底部带有与兽药或者非法添加物分子与载体蛋白形成的共价偶联物分子层的光纤生物生物传感器暴露于阴性样品或阴性样品与纳米金混合液，同时检测信号变化；

c)结合：将底部带有与兽药或者非法添加物分子与载体蛋白形成的共价偶联物分子层的光纤生物生物传感器暴露于孵育后的液体中，同时检测信号变化；

d)判断：根据信号变化情况，对液体中相应兽药残留或非法添加物含量进行判定。

如上所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法，其特征在于是光纤生物传感器是通过光纤耦合至光源及检测器的光学元件，该元件的远离光源的一端带有与兽药或非法添加物分子与载体蛋白形成的共价偶联物。

如上所述的分析样品中兽药残留或非法添加物含量的方法，其特征是孵育阶段的反应条件为：20℃-50℃反应1min-15min，优选37℃-45℃反应1-5min。