[发明专利]从螺旋藻中萃取藻蓝蛋白的方法

权利要求书

1.一种从螺旋藻中萃取藻蓝蛋白的方法，其特征在于包括：

(1)取新鲜或干燥的螺旋藻的藻体于液氮中研磨形成螺旋藻粉，并加入螺旋藻粉2-3倍质量的磷酸盐缓冲液形成螺旋藻粉悬浊液；

(2)向所述螺旋粉悬浊液中加入木瓜蛋白酶和糖化酶组成的复合酶，先于pH为4-6、30-45℃水浴超声溶解0.5-1.5h，再95-105℃水浴灭酶0.5-0.8h，然后60-80℃水浴浸提，弃上清液，获得沉淀物；

(3)将步骤(2)中获得的沉淀物采用30-50％的硫酸盐和磷酸盐形成的混合溶液分级沉淀，透析除盐，获得盐析剩余物；

(4)将所述盐析剩余物加-3-0℃去离子水反复清洗2-3次，之后加入含三氯乙酸和疏基乙醇的丙酮溶液超声混合后于-20--10℃静置1-2h，之后以1200-1500r/min的转速进行第一次离心处理20-40min；弃上清液、加入疏基乙醇的丙酮溶液于-20--10℃静置1-2h，之后以1200-1500r/min的转速进行第二次离心处理20-40min，弃上清液、冷冻干燥沉淀；所述沉淀即藻蓝蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述复合酶的体积浓度为0.5％～1％。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述复合酶中木瓜蛋白酶和糖化酶的质量比为1:1-1.5。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述硫酸盐包括硫酸铵和硫酸钠；所述磷酸盐包括磷酸铵和磷酸钠。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中所述盐析剩余物与含三氯乙酸和疏基乙醇的丙酮溶液的用量比为0.3-0.5g：1-1.3mL。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述三氯乙酸的质量体积比浓度为8-12％；所述疏基乙醇的体积分数为0.05-0.1％。