[发明专利]检测抗小麦白粉病Pm57基因的通用分子标记、引物、检测方法及应用

说明书

本发明属于小麦基因检测技术领域，具体涉及一种检测抗小麦白粉病Pm57基因的通用分子标记、引物、检测方法及应用。所述通用分子标记为分子标记X185442，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述引物的序列为：上游引物185442F：5’‑GCACGGTGGGTGTGTTCC‑3’和下游引物185442R：5’‑CTCACTATGATGTGTGAGGTTCTT‑3’。本发明提供的分子标记X185442能够同时检测出小麦‑西尔斯山羊草染色体2S^S#1添加系2011‑400和易位系89(6)88、89(5)69、89‑346这几种材料所含Pm57基因，通用性和检测效率高，降低了工作繁琐度。同时我们对分子标记X185442的PCR扩增体系进行优化，获得了与该分子标记X185442配套的高效的PCR体系及检测方法。

技术领域

本发明属于小麦基因检测技术领域，具体涉及一种检测抗小麦白粉病Pm57基因的通用分子标记、引物、检测方法及应用。

背景技术

Pm57基因是我们从西尔斯山羊草(Aegilops searsii,2n＝2x＝14,S^SS^S)转移到普通小麦的一个抗白粉病新基因，可有效预防小麦白粉病的发生，在小麦育种领域具有广泛的应用前景。因此，研究Pm57基因的功能与应用具有重要的生物学意义。Pm57基因位于西尔斯山羊草2S^S#1染色体长臂近端部，小麦-西尔斯山羊草染色体2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346所具有的2S^S片段上都含有抗白粉病Pm57基因。

但是由于每个小麦品种的基因型不同，目前尚没有能够同时检测小麦-西尔斯山羊草染色体2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346这几种材料所含Pm57基因的通用分子标记的报导。虽然现有技术中已有与Pm57基因连锁的分子标记X2L4g9p4/HaeIII，但开发X2L4g9p4/HaeIII标记的全长cDNA(AK331687)位于小麦第二同源群长臂的FL0.86-0.91之间，该分子标记不能检测89(6)88抗病材料所携带的Pm57基因，不具有通用性，在分子标记辅助选择方面应用有限。因此，研发一种能够同时检测出小麦-西尔斯山羊草染色体2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346这几种材料所含Pm57基因的通用分子标记尤为必要。

发明内容

本发明提供的一种检测抗小麦白粉病Pm57基因的通用分子标记、引物、检测方法及应用，该通用分子标记能够同时检测出小麦-西尔斯山羊草染色体2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346这几种材料所含Pm57基因，检测效率高，降低了工作繁琐度。

本发明的第一个目的是提供一种检测抗小麦白粉病Pm57基因的通用分子标记，所述通用分子标记为分子标记X185442，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明的第二个目的是提供一种用于扩增所述通用分子标记的引物，所述引物的序列为：

上游引物185442F：5’-GCACGGTGGGTGTGTTCC-3’

下游引物185442R：5’-CTCACTATGATGTGTGAGGTTCTT-3’。

本发明的第三个目的是提供一种利用所述引物检测抗小麦白粉病Pm57基因的方法，具体包括以下步骤：

S1，提取待检测小麦的基因组DNA；

S2，以所述小麦的基因组DNA为模板，以上游引物185442F和下游引物185442R为引物进行PCR扩增；