[发明专利]一种己烯雌酚类抗生素免疫亲和柱及其制备方法和用途

说明书

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种己烯雌酚类抗生素免疫亲和柱及其制备方法和用途，首先将采用环氧氯丙烷活化法活化的琼脂糖凝胶作为载体，然后将基因重组蛋白G偶联到载体上，得到了蛋白G‑sepharose，再将己烯雌酚抗体连接到蛋白G‑sepharose上，得到了抗体—蛋白G—sepharose，再用交联剂进行交联，得到了抗体—蛋白G—sepharose填料，最后将抗体—蛋白G—sepharose填料装柱后形成了高纯度和亲和力的己烯雌酚免疫亲和柱，充分利用基因重组蛋白G与己烯雌酚抗体特异性结合的特点，己烯雌酚抗体的Fab片段暴露在外，大幅度提高了基因重组蛋白G的抗体结合能力、己烯雌酚的捕捉能力和己烯雌酚的纯化效率；其亲和柱的结构简单，亲和柱制备方法操作简便，降低了时间和经济成本。

技术领域：

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种己烯雌酚类抗生素免疫亲和柱及其制备方法和用途。

背景技术：

亲和柱是将与纯化对象有专一结合作用的物质连接在不溶性载体上，制成亲和吸附剂后所装的柱，多用做亲和层析。

己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)、己烷雌酚(hexestrol,HEX)和双烯雌酚(dienestrol,DS)是结构相近的人工合成雌激素,均含有酚羟基，均为弱酸性化合物，由于其结构简单、易于合成和成本低等特点,近年来逐渐在饲料工业得到广泛应用，主要用于促进动物生长；其中的己烯雌酚(Diethylstilbestrol)是人工合成的非甾体雌激素物质，能产生与天然雌二醇相同的所有药理与治疗作用，主要用于雌激素低下症及激素平衡失调引起的功能性出血、闭经，还可用于死胎引产前，以提高子宫肌层对催产素的敏感性；但随着其致癌性的发现，2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，己烯雌酚在一类致癌物清单中，许多国家已规定己烯雌酚在畜禽与水产养殖中禁用。我国于1999年制定的《中华人民共和国动物及动物源食品残留监控计划》中规定己烯雌酚(DES)最大残留检测量为不得检出，而对于己烷雌酚(HEX)和双烯雌酚(DS)残留的测定标准尚待制定。