[发明专利]人源化GHR106单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体及核酸分子与应用

说明书

本发明提供了人源化GHR106单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体及核酸分子与应用，所述构建体具有序列表7所示核苷酸序列，所述核酸包含该构建体，可应用于免疫细胞，对于肿瘤的治疗具有重要应用价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是一种人源化GHR106单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体及核酸分子与应用。

背景技术

促性腺激素释放激素(GnRH)受体位于特定细胞类型的外膜上。通过与GnRH受体的特异性结合，脑下垂体前叶会释放GnRH。GnRH为一种能够刺激促性腺激素(促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH))释放的十肽激素。研究发现，GnRH或其类似物可以对癌细胞具有抗增殖作用(Pati,D.,et a l.,Endocrin(1995)136:75-84；Choi,K.C.,et al.,J ClinEndocrinolMetab(2001)86:5075-5078,)。GnRH类似物已被用于治疗人类不同的癌症和生育调节上的疾病。

GHR106单克隆抗体是由被对应于人类GnRH受体的细胞外结构域的合成肽免疫的老鼠所产生。GHR106表现为GnRH类似物，但GHR106拥有比本领域其它已知的GnRH类似物更长的半衰期。GnRH类似物在这数十年来已被用于治疗人类不同的癌症以及生育调节上的疾病。

美国专利号9,273,138(2016年3月1日)公开了鼠源化GHR106和人源化GHR106的核苷酸和氨基酸序列。生物化学和免疫学实验证实，鼠源化GHR106和人源化GHR106对人类GnRH受体的细胞外结构域具有高特异性和亲和力，而这些结构域在许多不同组织起源的癌细胞表面上都有表达。此外，这两种形式的GHR106与GnRH肽类似物雷同，可以诱导癌细胞的体外凋亡，但与GnRH肽类似物不同的是这两种形式的GHR106还可以诱导癌细胞的补体依赖性细胞毒性反应。

T细胞疗法(CAR-T)技术中的嵌合抗原受体(CAR)结合了T细胞免疫疗法，基因疗法和免疫疗法。CAR-T已被用于癌症治疗。嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR-T)修饰患者的T细胞，让T细胞表达CAR抗原受体，而让其识别肿瘤细胞上的表面抗原。使用CAR-T治疗癌症的尝试取得了一些成功。通过使用CD19相关的CAR平台去治疗不同类型的血液癌症就是一些成功的实例。US8916381公开了一种用CAR-T治疗白血病的方法。Brentijens等人(Molecular Therapy:Treatment of Chronic Lymphocytic Leukemia with GeneticallyTargeted Autologous T Cells:Case Report of an Unforeseen Adverse Event in aPhase I Clinical Trial.18Vol.Elsevier,04/01/2010)进行了用CAR-T治疗慢性淋巴细胞性白血病的临床试验。修饰过的T细胞能够识别在大多数B细胞恶性肿瘤上表达的CA19。

尽管如此，这些选择性靶向和杀死癌细胞的构建体和方法仍然有需要改进的地方。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种人源化GHR106单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供具有上述构建体的核酸分子。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述核酸分子的应用。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种人源化GHR106单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体，为信号肽(Signalpeptide)–GHR106scFv–CD8-4-1BB-cD3Z-2A-IL7，其核苷酸序列为图2D所述序列，具有序列表7所示核苷酸序列。

优选的，上述人源化GHR106单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体，其氨基酸为图2E所述序列，具有序列表8所示氨基酸序列。