[发明专利]克隆酶供体免疫检测试剂、制备方法、检测系统、检测方法以及试剂盒

权利要求书

1.一种克隆酶供体免疫检测试剂，所述克隆酶供体免疫检测试剂用于测定待测样本中抗原的含量，所述待测样本中的抗原为分子量小于或等于1500的有机小分子化合物，其特征在于，所述克隆酶供体免疫检测试剂包括：底物和缓冲液，所述缓冲液的pH为2.0～8.5所述底物能被克隆酶水解，所述克隆酶为β-D-半乳糖苷酶，所述底物为式(I)所示的β-D-半乳糖苷化合物：

其中Ar为苯基，所述苯基任选地被至少两个取代基取代，所述取代基选自氟、氯、溴、硝基、亚硝基、氰基、三氟甲基和酯基中至少一种或者多种。

2.根据权利要求1所述的克隆酶供体免疫检测试剂，其特征在于，所述苯基的邻位或对位任选地被至少两个取代基取代，所述取代基选自氟、氯、硝基、氰基或三氟甲基中至少一种或者多种。

3.根据权利要求1或2所述的克隆酶供体免疫检测试剂，其特征在于，还包括：

添加剂，以及抗体、EA或ED标记的抗原偶联物中的至少一种，

其中，所述添加剂选自：酶稳定剂、增溶剂、表面活性剂、防腐剂、电解质和金属螯合剂中的一种或几种；

所述抗体能与所述待测样本中的抗原或所述ED标记的抗原偶联物发生特异性结合。

4.根据权利要求3所述的克隆酶供体免疫检测试剂，其特征在于，所述缓冲液包括：pH为4.0～8.0的第一缓冲液和pH为5.0～8.5的第二缓冲液，所述克隆酶供体免疫检测试剂由第一试剂和第二试剂组成，

所述第一试剂包括：ED标记的抗原偶联物、第一缓冲液和酶稳定剂；

所述第二试剂包括：抗体、EA、第二缓冲液和酶稳定剂；

所述第一试剂或第二试剂还包括所述底物。

5.根据权利要求4所述的克隆酶供体免疫检测试剂，其特征在于，

所述第一试剂还包括选自增溶剂、表面活性剂、防腐剂，电解质或金属螯合剂中的一种或几种

所述第二试剂还包括选自防腐剂，电解质或金属螯合剂中的一种或几种。

6.根据权利要求4或5所述的克隆酶供体免疫检测试剂，其特征在于，

所述第一试剂的pH为4.0～6.5，所述第一试剂包括所述底物，且所述第一试剂中缓冲盐的浓度为10～100mM；所述第二试剂的pH为7.2～8.5，所述第二试剂中缓冲盐浓度为150～500mM；

所述第二试剂中缓冲盐浓度大于或等于所述第一试剂中缓冲盐浓度。

7.根据权利要求4或5所述的克隆酶供体免疫检测试剂，其特征在于，所述第二试剂由A试剂和B试剂组成；

所述A试剂包括：抗体、第二缓冲液和酶稳定剂；

所述B试剂包括：EA和酶稳定剂，以及水或pH为6.9～8.5的第三缓冲液。

8.一种克隆酶供体免疫检测试剂的制备方法，其特征在于，包括：将底物溶解于缓冲溶液中，所述底物为式(I)所示的β-D-半乳糖苷化合物：

其中Ar为苯基，所述苯基任选地被至少两个取代基取代，所述取代基选自氟、氯、溴、硝基、亚硝基、氰基、三氟甲基和酯基中至少一种或者多种；所述缓冲溶液的pH为2.0～7.0。

9.一种克隆酶供体免疫检测试剂的制备方法，其特征在于，包括：

配置第一试剂：包括将ED标记的抗原偶联物和酶稳定剂溶解于pH＝4.0～8.0的第一缓冲液中，和

配置第二试剂：包括将抗体、EA和酶稳定剂溶解于pH＝5.0～8.5的第二缓冲液中，

以及，将所述将底物溶解于第一试剂或第二试剂中。

10.根据权利要求9所述的克隆酶供体免疫检测试剂的制备方法，其特征在于，还包括：

将抗体和酶稳定剂溶解于所述第二缓冲液中获得对应第二缓冲液pH的A试剂，并

将EA和酶稳定剂溶解于水或pH＝6.9～8.5的第三缓冲液中获得B试剂，从而获得由A试剂和B试剂组成的第二试剂。