[发明专利]一种微藻DHA-花青素双相纳米脂质体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种微藻DHA‑花青素双相纳米脂质体及其制备方法。所述双相纳米脂质体主要由大豆磷脂、微藻DHA、花青素和十八胺组成，以柠檬酸‑柠檬酸钠体系为缓冲液；以占脂质体总质量比计，所述各组分含量：大豆磷脂4‑10mg/mL，微藻DHA2‑5mg/mL，花青素1.33‑3.33mg/mL，十八胺0.66‑1.67mg/mL，柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液200‑300mmol/L。其制备方法主要包括以下步骤：(1)原料溶解；(2)制膜；(3)制备花青素水相溶液；(4)洗膜；(5)高速剪切；(6)高压微射流均质；(7)将得到的微藻DHA‑花青素双相纳米脂质体进行储存、检验。本发明双相纳米脂质体可提高DHA和花青素的稳定性，改善口感、增加生物利用度；同时具有粒径均匀、包封率较高、zeta电位绝对值较大等优点。

技术领域

本发明属于食品技术领域，特别是涉及一种微藻DHA-花青素双相纳米脂质体及其制备方法。

背景技术

花青素，属酚类化合物中的类黄酮，为水溶性色素，广泛存在于植物花瓣、果实的组织中及茎叶的表面细胞与下表皮层，具有强抗氧化，抗癌症和防辐射的作用，亦扮演益生元角色调节大肠生物菌群比例，是一种广为人知的保健品和护肤品成分。DHA，二十二碳六烯酸，可促进幼儿大脑发育、预防肠道菌群失调、降低肥胖和慢性炎症几率，是幼儿饮食中极需强化的脂溶性营养素，人体脑细胞中大量存在DHA，在神经原表层高度富集，约占脑细胞脂肪酸的10％，亦有临床证据表明血浆中含较多DHA的孕妇生出的胎儿中枢神经系统成熟较快。

然而，花青素易受光、氧、酶和高温的破坏，直接作为营养强化剂难度大，目前仅有少数企业直接销售花青素产品；DHA腥味重、溶解性差、极易氧化，致使营养价值与产品货架期大幅下降，应用范围严重受限。脂质体是一种具有双分子层结构的封闭囊泡，是一种人工膜，在自组装过程中可同时包埋亲脂性 (双层膜之间)和亲水性(中心)功能营养物质。自1965年被英国剑桥大学 Bangham教授团队发现以来，脂质体在医药、化妆品和基因工程等领域有了广泛应用，目前已有超过18种包埋了不同抗癌药物的脂质体产品经过了美国FDA批准上市。

动态高压微射流(dynamic high-pressure microfluidization,DHPM)是一种高压均质技术，它利用液压泵使流体产生高压，实现高速撞击、高频剪切、气蚀、高频振动、瞬时压降等综合作用，在100MPa下，时间小于5s即可达到使物料细化、乳化、均质和改性等目的。本发明将传统的薄膜分散法与DHPM技术相结合，用于制备微藻DHA-花青素纳米脂质体，既可克服微藻DHA、花青素各自的弱点，避免使用大量有毒试剂，提高脂质体安全性，又可在一定程度上减小脂质体粒径且使颗粒分散均匀，提高营养素包封率，适用于大规模连续化生产。

中国专利申请201510787539.0公开了一种靶向脂质体包裹水相纳米金复合物的制备方法，将氢化大豆磷脂，胆固醇，P-DSPE混合，加入氯仿溶解于圆底烧瓶中，然后旋转蒸发，至瓶壁上形成一层膜，放入真空干燥箱过夜，将纳米金溶液超滤离心浓缩，逐步加入硫酸铵溶液((NH₄)₂SO₄)，然后将该含有纳米金的硫酸铵溶液加入到上述圆底烧瓶中，置于恒温水浴摇床上进行脂质体对纳米金的包裹，超声半小时后，过层析柱葡聚糖凝胶，收集脂质体层析液得到脂质体包裹纳米金的微球。

中国专利申请201711175784.1公开了一种柔性脂质体的制备方法，定量称取蛋黄卵磷脂、胆固醇、胆酸钠和维生素E，加入到圆底烧瓶中，添加氯仿- 甲醇复合溶剂使其溶解，负压旋转蒸发清除有机溶剂，直至烧瓶壁出现暗黄色均匀薄膜；加入聚乙二醇的磷酸盐缓冲液，旋转洗膜；在冰水浴中适度超声，使用0.22微米微孔滤膜滤除大颗粒；取少量维生素E溶取脂质体原液，使用超速离心将脂质体从混悬液体系中分离，使用微孔滤膜过滤，去除清液后即得柔性脂质体。