[发明专利]一种高效稳定的细胞表达载体、表达系统及其制备方法、应用在审
申请号: | 201810291628.X | 申请日: | 2018-04-03 |
公开(公告)号: | CN110343718A | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 王天云;田政伟;王芳;李琴;王小引;贾岩龙;郭潇;徐丹华 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院;华兰生物疫苗有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
地址: | 453003*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞表达载体 表达载体 表达系统 制备 蛋白表达水平 基因工程技术 驱动目的基因 表达水平 双重功能 同等条件 外源基因 稳定表达 重组蛋白 内含子 构建 可用 应用 生产 | ||
1.一种高效稳定的细胞表达载体,其特征在于:包含MAR序列,所述MAR序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述MAR序列位于表达载体中表达区域的启动子上游或Poly A下游。
2.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体的出发载体为pIRES-neo、pIRES-neo2、pIRES-neo3、pEGFP-C1、pcDNA1.1、pCHO1.0载体中的任意一种。
3.根据权利要求2所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体的出发载体为pIRES-neo、pIRES-neo2、pIRES-neo3载体中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述启动子为CMV、SV40或EF1-α启动子。
5.如权利要求1所述的表达载体的制备方法,其特征在于:包括:将所述MAR序列插入出发载体表达区域的启动子上游或Poly A下游,即得。
6.如权利要求1所述的表达载体构建得到的细胞表达系统。
7.如权利要求6所述的表达系统的制备方法,其特征在于:包括:将所述表达载体转染至宿主细胞中,即得。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于:所述宿主细胞为DG44、DXB11、CHO-K1或CHO-S细胞。
9.如权利要求1-4任一项所述的表达载体或权利要求6所述的表达系统在制备目的蛋白以及包含目的蛋白的基因治疗制剂中的应用。
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