[发明专利]一种检测水中土霉素的试剂盒的使用方法有效
| 申请号： | 201810293195.1 | 申请日： | 2018-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN108519360B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 林雪霞;叶楚莹;林洪贵;周树锋 | 申请（专利权）人： | 华侨大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;姜谧 |
| 地址： | 362000 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 水中 土霉素 试剂盒 使用方法 | ||
1.一种检测水中土霉素的试剂盒的使用方法，其特征在于：该试剂盒包括：
一发光纳米材料溶液，其溶质为纳米材料碳点，浓度为0.8~1.2mg/mL，该纳米材料碳点的激发波长为358nm，发射波长为455nm；
一A溶液，为寡核苷酸溶液，浓度为8~12µM，其中的寡核苷酸的序列如SEQ ID NO 01所示，溶剂为45~55mM Tris-HCl溶液；
和一缓冲液，为450~520mM NaCl-MgCl2-CaCl2 45~55mM Tris-HCl溶液；
其使用方法包括如下步骤：
（1）将所述发光纳米材料溶液、A溶液和缓冲液以2:1~5:360的体积比充分混合，得混合溶液；
（2）将预处理过的水样与上述混合溶液以1:97~99的体积比混合均匀后，A溶液中的寡核苷酸与土霉素能进行特异性结合形成复合体，再与纳米材料碳点反应，促进了发光强度的下降，用荧光分光光度计进行检测，检测的激发波长为358nm，发射波长为455nm。
2.如权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述发光纳米材料溶液的浓度为1mg/mL。
3.如权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述A溶液的浓度为10µM，溶剂为50mM Tris-HCl溶液。
4.如权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述缓冲液为500mM NaCl-MgCl2-CaCl2 50mM Tris-HCl溶液。
5.如权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述步骤（1）为：将所述发光纳米材料溶液、A溶液和缓冲液以2:5:360的体积比充分混合，得混合溶液。
6.如权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述步骤（2）为：将预处理过的水样与上述混合溶液以1:98的体积比混合均匀后，A溶液中的寡核苷酸与土霉素能进行特异性结合形成复合体，再与纳米材料碳点反应，促进了发光强度的下降，用荧光分光光度计进行检测，检测的激发波长为358nm，发射波长为455nm。
7.如权利要求1至6中任一权利要求所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：水样的预处理为：经过2.5微米孔径的滤膜过滤，再通过C18固相萃取柱处理。
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