[发明专利]一种检测水中土霉素的试剂盒的使用方法

说明书

本发明公开了一种检测水中土霉素的试剂盒，包括一发光纳米材料溶液、一A溶液和一缓冲液，发光纳米材料溶液的溶质为纳米材料碳点；A溶液为寡核苷酸溶液，其中的寡核苷酸的序列如SEQ ID NO 01所示，溶剂为45～55mM Tris‑HCl溶液；缓冲液为450～520mM NaCl‑MgCl₂‑CaCl₂45～55mM Tris‑HCl溶液。本发明在发光纳米材料溶液\A溶液和缓冲液的共同作用下，经过简单预处理的水样经处理后即可以进入荧光分光仪进行检测。由于A溶液中的寡核苷酸与土霉素能进行特异性结合形成复合体，再与纳米材料碳点反应，促进了发光强度的下降。随着土霉素含量的增加，发光强度逐渐的下降。

技术领域

本发明属于膜清洗技术领域，具体涉及一种检测水中土霉素的试剂盒。

背景技术

随着抗生素的普遍使用，导致环境中存在各种人为产生的各种抗生素，长期饮用含抗生素自来水，细菌会产生耐药基因，势必影响生态环境平衡和人体健康。我国是抗生素生产和使用大国，占世界土霉素生产总量的65％，随着环境中微量污染物问题被不断提出，对这些抗生素的检测就越来越重要，而抗生素的检测方法称为相关研究的重点。

土霉素Oxytetracycline(OTC)，别名地霉素，氧四环素，四环素等，属四环素(TC)类光谱抗生素，具有良好的抑菌杀菌作用和促进动物生长发育作用，被应用于水产养殖和畜牧业中，随着养殖用水排放流入自然环境中，污染水资源，由于四环素类抗生素往往同时存在饮用水中，因此建立四环素类抗生素的检测方法，防止抗生素被滥用，具有十分重要的意义。

传统检测水中抗生素技术主要有色谱法和其联用技术、酶免疫分析法。其中液相色谱法(LC)在废水抗生素的检测中是最常见的，但常需与其他技术其配合使用，需要昂贵的仪器和较长的检测时间。其次，酶免疫分析方法对试剂的选择性高，很难同时分析多种成分，对结构类似的化合物有一定程度的交叉，分析分子量很小的化合物和不稳定的化合物有一定的困难。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测水中土霉素的试剂盒。

本发明的技术方案如下：

一种检测水中土霉素的试剂盒，包括：

一发光纳米材料溶液，其溶质为纳米材料碳点，浓度为0.8～1.2mg/mL，该纳米材料碳点的激发波长为358nm，发射波长为455nm；

一A溶液，为寡核苷酸溶液，浓度为8～12μM，其中的寡核苷酸的序列如SEQ ID NO01所示，溶剂为45～55mM Tris-HCl溶液；

和一缓冲液，为450～520mM NaCl-MgCl₂-CaCl₂45～55mM Tris-HCl溶液。

在本发明的一个优选实施方案中，所述发光纳米材料溶液的浓度为1mg/mL。

在本发明的一个优选实施方案中，所述A溶液的浓度为10μM，溶剂为50mM Tris-HCl 溶液。

在本发明的一个优选实施方案中，所述缓冲液为500mM NaCl-MgCl₂-CaCl₂50mMTris-HCl溶液。

上述试剂盒的使用方法，包括如下步骤：

(1)将所述发光纳米材料溶液、A溶液和缓冲液以2∶1～5∶360的体积比充分混合，得混合溶液；

(2)将预处理过的水样与上述混合溶液以1∶97～99的体积比混合均匀后，用荧光分光光度计进行检测，检测的激发波长为为358nm，发射波长为455nm。

在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(1)为：将所述发光纳米材料溶液、A溶液和缓冲液以2∶5∶360的体积比充分混合，得混合溶液。