[发明专利]一种小麦醇溶蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用在审

专利信息
申请号: 201810299600.0 申请日: 2018-04-04
公开(公告)号: CN108277206A 公开(公告)日: 2018-07-13
发明(设计)人: 匡华;曾露;胥传来;徐丽广;刘丽强;宋珊珊;吴晓玲;胡拥明 申请(专利权)人: 江南大学;无锡迪腾敏生物科技有限公司
主分类号: C12N5/20 分类号: C12N5/20;C07K16/16;G01N33/68;C12R1/91
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214122 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 小麦醇溶蛋白 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 保藏 应用 抗体 分泌 中国微生物菌种 酶联免疫检测 免疫检测技术 食品过敏原 双抗体夹心 微生物中心 包被抗体 酶标抗体 食品安全 标准品 细胞株 检测 管理
【权利要求书】:

1.一种小麦醇溶蛋白单克隆细胞株,已于2017年9月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.14687,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。

2.一种小麦醇溶蛋白单克隆抗体,其特征在于,由权利要求1所述的保藏编号为CGMCCNo.14687的单克隆细胞株分泌产生。

3.权利要求2所述的小麦醇溶蛋白单克隆抗体的应用。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,用于食品中小麦醇溶蛋白的分析检测。

5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,用于制备ELISA竞争法检测小麦醇溶蛋白的试剂。

6.制备权利要求1所述单克隆细胞株的方法,其特征在于,用小麦醇溶蛋白免疫动物,从动物体内分离多克隆抗体。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,具体步骤如下:

(1)动物免疫与效价测定:先采用小麦醇溶蛋白与等量弗氏完全佐剂混匀后进行皮下注射,间隔2~3周后,再用小麦醇溶蛋白与等量弗氏不完全佐剂加强免疫,此后每隔2~3周用半量小麦醇溶蛋白加强免疫一次;冲刺免疫剂量减半,与等体积的生理盐水混合后采用腹腔免疫,用小麦醇溶蛋白作为包被抗原,通过直接ELISA法检测血清效价;

(2)细胞融合与筛选:在冲击免疫三天后,进行细胞融合,并用小麦醇溶蛋白作为包被抗原,用直接ELISA进行检测,获得能稳定分泌小麦醇溶蛋白单克隆抗体的细胞株。

8.含有权利要求2所述小麦醇溶蛋白单克隆抗体的组合物。

9.一种小麦醇溶蛋白检测试剂盒,其特征在于,含有权利要求2所述的单克隆抗体、固相载体,用于包被所述固相载体的抗体,能与检测抗原结合的酶标抗体,显色底物,洗涤液和封闭液;所述用于包被所述固相载体的抗体为杂交瘤细胞CGMCC No.14687分泌的单克隆抗体。

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