[发明专利]一种呼吸道发热病原体多联荧光PCR检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种呼吸道发热病原体多联荧光PCR检测试剂盒，包括PCR扩增试剂和对照试剂，所述的PCR扩增试剂由PCR反应缓冲液A、酶系B和各种病原体引物探针混合液构成，所述的对照试剂主要由阴性对照和阳性对照组成，所述的PCR反应缓冲液A的成分为5*Buffer，2.5mM dNTPs，所述的酶系B主要由HotStart Hi Taq DNA聚合酶、M‑MLV反转录酶和RNA酶抑制剂构成，所述的12种呼吸道发热病原体检测引物探针包含甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、甲型流感病毒H1N1(2009)、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体、人副流感1型、人副流感2型和人副流感3型检测引物探针。本发明具有灵敏度高、使用方便等优点。

技术领域

本发明涉及生物技术和病原体检测领域，具体来说是一种呼吸道发热病原体多联荧光PCR检测试剂盒。

背景技术

呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统，分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，常见病原体为病毒，少数为细菌。明确引起感染的病原体，选择合适的治疗方案，可以有效的防止抗生素滥用，使患者得到及时有效的治疗。

流感病毒(FLU)是一种有包膜、分节段基因组的单链RNA病毒，属于正粘病毒科。根据核蛋白和包膜内侧面的M1蛋白的抗原性将流感病毒分甲、乙、丙三型。甲型流感病毒再根据包膜表面血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)两种刺突的抗原性分若干亚型，目前包括H1～H16亚型和N1～N9亚型，甲型流感病毒的亚型是把HA和NA列在一起命名的。H1N1、H3N2为较常见的季节性流感病毒。甲型流感病毒(FluA)每10年到30年会大爆发一次，而且每年都会发生甲型或乙型流感病毒(FluB)流行病。流感病毒的感染是季节性的，特别在北半球是从11月到4月容易爆发。小孩和老年人以及长期患有心血管肺炎的病人易于被感染。通过吸入空气中飞沫或者传染物仅经过1～3天潜伏期就会散播出去。

呼吸道合胞病毒(RSV)是单链RNA包膜病毒，含有两个亚型—A型和B型。广泛分布于世界各地，是引起婴幼儿下呼吸道感染主要的和常见的病原体，在绝大部分地区RSV所致的1岁以内婴幼儿肺炎和支气管炎远远高于其他病原微生物。成年人感染会导致普通感冒。RSV通常是季节性的，易于在冬天和早春感染并引起多达5个月的流行期。我国每年数千万住院的婴幼儿因RSV感染的占50％，且RSV的再感染率很高，成人RSV的再感染同样很常见。该病毒具有传染性强，症状与副流感病毒肺炎、轻症流感病毒肺炎及轻症腺病毒肺炎在临床上几乎无法区别，因此，实验室诊断就显得非常重要。

副流感病毒(PIV)是单链RNA包膜病毒，四种亚型各有不同的临床和流行病学特征。1型和2型的最典型的临床特征是造成儿童喉气管支气管炎，1型是儿童喉气管支气管炎的主要原因，而2型次之。1型和2型均能造成其它的上呼吸道和下呼吸道疾病。3型经常导致肺炎和细支气管炎。4型通常被认为散发存在，引起的呼吸道症状轻微。副流感病毒常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于呼吸道合胞病毒(RSV)。人类副流感病毒的潜伏期一般在1～7天左右。

腺病毒(AdV)是一种双链DNA病毒，共有52种血清型，分为A、B、C、D、E和F六个亚属，引起呼吸道感染的主要为B、C、E亚属。腺病毒感染呼吸道的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎，同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉痛等，一般潜伏期5～7天左右，容易侵犯6个月至5岁小孩，占儿童呼吸道感染5％～20％。一般秋春以呼吸道感染为多，春、初夏以合并结膜炎为多。大部份由飞沫传染，少部份由粪便接触感染。疾病的过程约5～7天，也有进入第二星期的。感染2～3星期后产生抗体，可持续一至数年，同型病毒再感染的机率很少。腺病毒引起的呼吸道、泌尿道以及胃肠道感染在临床表现方面与其他病原微生物的感染非常相似，因此，仅根据临床表现来进行疾病的诊断是比较困难的，需要进行实验室诊断加以证实。