[发明专利]成胶因子的制备方法和水凝胶的制备方法以及应用

权利要求书

1.一种成胶因子的制备方法，其特征在于，其包括：通过固相合成方法合成Nap-Phe-Phe-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH肽段，再脱除酪氨酸侧链和谷氨酸侧链上的tBu保护基；

其中，Nap为萘基，Phe为苯丙氨酸，Glu为谷氨酸，Tyr为酪氨酸。

2.根据权利要求1所述的成胶因子的制备方法，其特征在于，由所述制备方法得到的所述成胶因子具有序列：Nap-Phe-Phe-Glu-Tyr-OH，具体结构如下：

3.根据权利要求1所述的成胶因子的制备方法，其特征在于，通过固相合成方法合成的所述Nap-Phe-Phe-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH肽段为：

Nap-_L-Phe-_L-Phe-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH肽段，

或Nap-_D-Phe-_D-Phe-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH肽段。

4.根据权利要求2所述的成胶因子的制备方法，其特征在于，固相合成固相合成方法合成Nap-Phe-Phe-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH肽段包括：

将2-氯三苯甲基氯树脂在N,N-二甲基甲酰胺内溶胀后，加入第一个氨基酸酪氨酸和N，N-二异丙基乙胺进行第一次反应；

加入含有哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶胀，再加入活化的第二个氨基酸谷氨酸和N，N-二异丙基乙胺进行第二次反应；

再次加入含有哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶胀，然后加入活化的第三个氨基酸苯丙氨酸和N，N-二异丙基乙胺进行第三次反应；

再加入含有哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶胀，加入活化的第四个氨基酸苯丙氨酸和N，N-二异丙基乙胺进行第四次反应；

再加入含有哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶胀，加入活化后的萘乙酸和N，N-二异丙基乙胺进行第五次反应；

用含三氟乙酸的二氯甲烷从所述2-氯三苯甲基氯树脂上切下合成的所述Nap-Phe-Phe-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH肽段。

5.根据权利要求4所述的成胶因子的制备方法，其特征在于，所述第一个氨基酸、第二个氨基酸、第三个氨基酸、第四个氨基酸以及所述萘乙酸均用HOBT和HBTU进行活化以及基团保护。

6.根据权利要求4所述的成胶因子的制备方法，其特征在于，所述含有哌啶的N,N-二甲基甲酰胺中的哌啶的体积浓度均为15～25％；

优选地，每次溶胀的时间均为4～8分钟；

优选地，所述第一次反应、所述第二次反应、所述第三次反应、所述第四次反应以及所述第五次反应的反应时间均为2～3小时；

优选地，所述含三氟乙酸的二氯甲烷中的三氟乙酸的体积浓度为0.8～1.2％。

7.根据权利要求2所述的成胶因子的制备方法，其特征在于，其制备方法还包括在脱除所述tBu保护基后进行纯化，优选地，使用旋转蒸发仪除去溶剂后利用制备型高效液相色谱纯化；

优选地，脱除所述tBu保护基是通过含有体积浓度为94～96％的三氟乙酸的脱除液进行脱除；优选地，所述脱除液包括：94～96％的三氟乙酸、2～4％的三异丙基硅基以及1.5～2.5％的二氯甲烷。

8.一种水凝胶的制备方法，其特征在于，其包括：

通过权利要求1～7任一项所述的成胶因子的制备方法制备得到成胶因子；

利用所述成胶因子对他克莫司进行包覆。

9.根据权利要求8所述的水凝胶的制备方法，其特征在于，其主要通过以下步骤得到：将所述成胶因子、他克莫司以及磷酸盐缓冲溶液的混合液进行加热后冷却；

优选地，将所述混合液加热至45～55℃后，再冷却至室温；

优选地，所述混合液是在含有5～1510μg/mL他克莫司的0.1～0.3M的磷酸盐缓冲溶液中溶解0.5～2wt％的所述成胶因子。

10.如权利要求1～7任一项所述的成胶因子的制备方法得到的成胶因子或如权利要8～9任一项所述的水凝胶的制备方法得到的水凝胶在制备治疗器官移植排斥反应的药物中的应用。