[发明专利]RPL13A作为内参基因在RT-qPCR检测进入高原前后血液中基因表达中的应用在审
申请号: | 201810308033.0 | 申请日: | 2018-04-08 |
公开(公告)号: | CN108611423A | 公开(公告)日: | 2018-10-02 |
发明(设计)人: | 李翠莹;李小薇;肖军;刘娟;范秀 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军空军总医院 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 100000 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因表达 内参基因 高原 血液 扩增效率 目的基因 稳定度 检测 实时荧光定量PCR 应用 检测技术领域 转录 表达水平 定量检测 基因定量 稳定表达 人血液 低氧 扩增 基因 分析 发现 | ||
1.RPL13A作为内参基因在RT-PCR检测进入高原前后血液中基因表达中的应用;所述基因为低氧相关通路相关的基因。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述RPL13A具有如序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述RPL13A的扩增引物包括正向引物和反向引物;所述正向引物具有如序列表中SEQ ID No.2所示的核苷酸序列;所述反向引物具有如序列表中SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述血液包括白细胞层。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述高原的海拔高度为3500~4500米。
6.根据权利要求1或5所述的应用,其特征在于,所述进入高原前所处区域的海拔高度为70~500米。
7.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,进入高原后的时间为2~4d。
8.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述低氧相关通路相关的基因包括EPAS1或EGLN1。
9.根据权利要求1或8所述的应用,其特征在于,所述RT-PCR检测的扩增程序为95℃,2min;95℃、5s,退火57℃、20s,延伸72℃,20s,共40个循环;72℃,10min。
10.一种检测进入高原前后血液中基因表达的试剂盒,其特征在于,包括权利要求3所述应用中的引物。
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