[发明专利]一种沙门氏菌的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种沙门氏菌的检测方法，包括如下步骤：

步骤一，制备探针分子：根据沙门氏菌的基因组结构和保守序列，选取沙门氏菌的invA基因作为检测目标片段，根据GenBank: EU348365公开的沙门氏菌invA基因序列，设计探针分子，所述探针分子序列为5’-GCGAGTGGTAAATTATTCCGATGAAGT-3’，所述探针分子的5’端采用报告荧光基团进行标记，即探针分子结构为：报告荧光基团- GCGAGTGGTAAATTATTCCGATGAAGT；

步骤二，将聚苯乙烯纳米球溶液与步骤一所制得的探针分子：报告荧光基团- GCGAGTGGTAAATTATTCCGATGAAGT混合，然后加入待测样品，检测荧光。

2.根据权利要求1所述的沙门氏菌的检测方法，其特征在于，步骤一中所述的报告荧光基团优选为异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)、四甲基罗丹明（TAMRA）、ROX、CY3、CY5、CY5.5、CAL red、Red640和Texas Red等。

3.根据权利要求1或2所述的沙门氏菌的检测方法，其特征在于，步骤二中所述的聚苯乙烯纳米球由以下方法制备得到：将0.05g过硫酸氨和0.05g十二烷基磺酸钠溶解到10mL水中，再加入12mL苯乙烯，将反应物加热一段时间，然后将产物离心，用甲醇冲洗移除SDS，即制得聚苯乙烯纳米球。

4.一种用于沙门氏菌检测的试剂盒，其包括：探针分子溶液、聚苯乙烯纳米球溶液、阳性对照质粒、阴性对照，其中所述探针分子的结构为：报告荧光基团- GCGAGTGGTAAATTATTCCGATGAAGT。

5.权利要求1或2或3所述的沙门氏菌的检测方法或权利要求4所述的用于沙门氏菌检测的试剂盒在用于食品中沙门氏菌的检测，所述的食品为肉类食品、乳制品或果蔬制品，其中肉类食品优选为鲜肉制品，所述乳制品优选为鲜牛乳，所述新鲜果蔬制品优选为新鲜果蔬或者鲜榨果蔬汁。